図2にあげた制限酵素のうち,よく使われる2種のものが識別する
持する DNA 組換え技術をクローニングと プラスミド
用確認局題2d
ホ
間1
の塩基配列と切断箇所を次の図3に示す。 次の各間に答えよ。
次の文を読み,後の各間に答えよ。
結菌などに遺伝子を組み込み,これを維
-GfG-A-T-C-Cc-3"
3-C-C-T-A-G+G-s
Sau 3A 3tc-A-T-C-"
5"
Bam HI
5
大腸菌細胞
3-C-T-A-G+s
切断
う。これにはプラスミドを使う便利な方
出がある。プラスミドとは,細菌細胞中に独
プラスミド
切断
図3
立して存在する環状2本鎖 DNAで(図1),
数側の遺伝子を含む,プラスミドを使うク
ローニングの基本的な手順は次のようにな
(1) 塩基配列が完全にランダムな DNA の 1000 塩基対の長さ当たり、
Sau 3A が切断する箇所の数は平均いくつか。少数第1位を四捨五入し
て,整数値で答えよ。
(2) Sau3A が切断部位として認識する塩基配列のうち, Bam HIで切断さ
核様体
プラスミド
る。
図1
れる割合を,理由を付し110字以内で述べよ。
問2 図2の DNA 断片を取り出す元になる供与 DNA から, 図2で使用する
ケS関 AM る
手順1.クローニングしたい遺伝子を含む DNA断片を, プラスミドの DNA
AMC
プラスミドに挿入する DNA 断片を得るには, 供与 DNA をどのような酵
分子に挿入して組換えプラスミドをつくる (図2)。
への
素で処理すればよいか。 40字以内で述べよ。
DNA 断片
組換えプラスミド
プラスミド
カエルの発生で、下後りの
C+1
O
るか
制限酵素に
3 下線でのよる切断
DNA リカーゼ
による結合
DVVI
サー分AMI
図2
8生類の卵では、精子侵入後10分
ア順3.宿主細胞内でプラスミドは複製され, 宿主細胞が分裂すると組換え
プラスミドのコピーは子孫の細胞に受け渡される。
えてくれる
予順2.組換えプラスミドを, 宿主細胞(大抵は大腸菌) に入れる。
るれA(大大)
めて