Biology
高中
問2、問4の考え方を教えてください。何度もこのような問題が今まで出て きたのですが、 1度もちゃんと溶け たことがありません。 パターン化して考えた方が良いのでしょうか?考え方を教えてください。
第6問 次の文章(A B) を読み, 下の間い(間1~7)に答えよ。(配さ
1
遺伝子X
図 3
A ある生物の遺伝子を含む DNA 断片を別の DNA に組み込む技術を、遺に
組換えとよぶ。遺伝子組換えにより。他の生物の遺伝子を大腸菌に導入して
させることができる。 組み込んだ遺伝子を細胞内へ運ぶためのペクターとしてよ
く用いられるのが,プラスミドとよばれる小型の環状 DNA である。 プラス3
は大腸菌内で複製を繰り返して増殖できる。ベクターに遺伝子を組み込む際には、
制限酵素で DNA を切断し,DNAリガーゼで DNA断片どうしを連結させる。
プラスミドには様々なものがあり, 図1のようにプラスミドQは、 抗生物質
Sに対する耐性遺伝子Sと抗生物質Tに対する耐性遺伝子Tをもつ。図中のS
は遺伝子 S, Tは遺伝子T, PS は遺伝子Sのプロモーター, PT は遺伝子Tの
プロモーターを示し, PS と PT の矢印は転写の方向を示す。 プラスミドQには、
制限酵素Iの認議配列 (図2上) と制限酵素Iの認識配列(図2下)が存在し、それ
ぞれの位置を図1中のIと目で示している。Pは組み込んだ遺伝子を発現させる
プロモーターであり, 矢印は転写の方向を示す。 図3はプラスミドQに組み込
む遺伝子Xを含む DNA 断片であり, 矢印は転写の方向を示し, 1とIは制限
酵素1と制限酵素Iの認識配列の位置を示す。 遺伝子Xが大腸菌内で発現する
と正常なタンパク質Xが合成される。 プラスミドQ と遺伝子Xを用いて, 次の
実験1-実験2を行った。
実験1 多数のプラスミドQと遺伝子Xを含む DNA 断片を用意して, それぞ
れを制限酵素1と制限酵素Ⅱで処理して完全に切断した後に混合し,その後,
DNA リガーゼを加えてしばらく静置した。 これを遺伝子Sと遺伝子Tをとも
にもたない大陽菌を含む培養液に加えて, プラスミドQや遺伝子X を含む
DNA 断片に由来する環状 DNA (以後,これらをプラスミドQ* とよぶ)を取
り込ませた。この培養液を抗生物質Sを含む寒天培地または抗生物質Tを含む
寒天培地にそれぞれ数演入れて拡げ、適当な時間培養すると, 抗生物質Sを含
む寒天培地では図4a, 抗生物質Tを含む寒天培地では図4bのようにコロ
ニー(●で示す)が形成された。なお, 図中のi~田は特定のコロニーを示し
ている。
実験2 実験1でコロニーが生じた寒天培地の上からセロハンをかぶせてセロハ
ンに大腸菌を付着させ, このセロハンをそのまま新しい寒天培地に接触させる
ことで、コロニーの位置関係が保たれた状態で大腸菌を植え継ぐことができる。
この方法で、図4aの大腸菌を抗生物質Tを含む寒天培地に植え継いだところ。
図5aのように新たにコロニーが形成され, 図4bの大腸菌を抗生物質Sを含
む寒天培地に植え継いだところ、 図5bのように新たにコロニーが形成された。
複製起点
PT
I
PS
制限酵素1の認識配列
5-GAATTC-3
3-CTTAAG-5"
b
b
T
プラスミドQ
S
制限酵素Iの認配列
5-AAGCTT-3
3-TTCGAA-5
図 5
1/1
図 1
図 2
図 4
問2実験1について, DNA リガーゼで処理した後に生じるプラスミドQ*とし
て誤っているものを, 次の0~④のうちから一つ選べ。 なお,選択肢の図中の
矢印は,DNA リガーゼによる結合部位を示している。
26
0
T
S
T
X
S
T
問4 実験1.実験2を繰り返したところ, 抗生物質Sを含む寒天培地では増殖で
きるが,抗生物質Tを含む寒天培地では増殖できない大腸菌のコロニーは現れ
なかった。この理由として最も適当なものを, 次の①~④のうちから一つ選べ。
ただし,この実験で生じたプラスミドQ*は, その種類によって大腸菌に取り
込まれる効率に差はないものとする。 また, プラスミドQが制限酵素で切断
されて生じた DNA 断片のうち, 遺伝子Sをもつ方の DNA断片を「断片 SJ,
遺伝子Tをもつ方の DNA 断片を「断片 T」 とし, 遺伝子 Xを含む DNA断片
を「断片 X」とする。
28
0 断片Sが断片 X と結合する際に, P の転写の方向と Xの転写の方向が逆
向きに結合した。
2断片Sが断片 X と結合する際に, 遺伝子Sにフレームシフトが生じた。
③ 断片 Tを含まないプラスミドは複製ができず, 増殖できなかった。
の プロモーター PSに突然変異が生じ, その機能が失われた。
解答
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