✨ คำตอบที่ดีที่สุด ✨
①アラビノースがない状態でアンピシリンを加えたら大腸菌はどうなった？
②自分で書いたであろうコロニーの様子にそのまま書いてますよ。それと①を絡めて。
③UVによって光るかどうか、対照実験になるやつを探して。
感想 高校でこんな実験させてくれるとこなんてなかなかないと思うよ。
Biology
มัธยมปลาย
เคลียร์แล้ว
大至急です！
ガチでお願いです明日の朝までなんです😭
考察の①、②、③の答えを教えて欲しいです🙇♀️
出来れば感想もどのようなことを書けば良いか教えて頂けると助かりますm(_ _)m
教科書を参考にお願いします！
実験:① 教科書の手順にしたがって作成した4種類のプレート(1)LB プレート-DNA
DNA (3)LB/Amp プレート-DNA (4) LB/Amp/Ara プレート + DNA を用意する。
② 大腸菌サンプルを滴下して、 塗り広げた後に, 37℃の定温器の中で翌日まで放置する。
③ 大腸菌のコロニーが確認できた場合は, UV ランプを照射して GFP の存在を確認する。
結果
LBプレート-DNA
LB/Ampプレート + DNA
アンピシリン
LB/Ampプレート-DNA
LB/Amp/Ara プレート + DNA
アラビノース
大腸菌のコロニーのようす (数や色も記入)
プレート全面に大腸菌が増殖
アンピシリンを添加しても生
生育できる
疑問･考察･感想
考察
以下の点について実験結果より考察しなさい。
① アンピシリン (Amp) は大腸菌に対してどのような影響を与えていると考えられるか。
(
(2) LB/Amp プレート+
[アンビシリン
UVを照射したようす
X
X
X
)
A
B
C
② 形質転換されていない大腸菌(-ÓNA) をまいた2枚のプレートのうち、どちらのプレートに大腸菌が増殖して
いるか、 その理由も述べなさい｡
(
)
D
③ 形質転換されたかを確認するためには, 4 枚のなかの、 どの2枚のプレートを比較したらよいだろうか。 また,
そのように考えた理由も述べなさい。
観察実験
大腸菌を使った遺伝子組換え実験
[目的]
大腸菌に蛍光タンパク質を合成するGFPの遺伝子をもつプ
ラスミドを導入し、バイオテクノロジーにおける遺伝子組換
えのしくみを理解する。
150
大腸菌の遺伝子組換えに必要な用具 (大腸菌 LB/寒天粉末
プレート アンビシリン、アラビノース, 遺伝子組換え
プラスミド, 形質転換溶液 樹液 マイクロピペット､
マイクロチューブ,チューブラックなど、 市販のキットを用
いてもよい)。 UV ランプ、 水槽 温度計, タイマー。
ごめんすいき
氷 (クラッシュアイス), 定器 蒸留水
事前準備 (8人分)
①大腸菌を培養する以下のプレートを調整し、ふたの上面に
内容を記入する。
LB プレート16枚(8枚のプレートにDNA・LB と記入。
残り8枚には何も記入しない) DNAとは､プラスミド
を感染させない大腸菌を植え付けることを意味する。 LB/
寒天粉末 7gを蒸留水200mLに溶解し､オートクレーブ
処理 (120℃, 20分) したあと, プレート 16枚に分注する。
LB/Amp プレート16枚(8枚のプレートにDNALB/
Amp, 残り8枚のプレートに+DNALB/Amp と記入):
+DNAとは、プラスミドを感染させた大腸菌を植え付け
ることを意味する。 Ampは、 アンピシリンという抗生物
質の添加を意味する。 作成方法は、 LB/Amp/Ara プレー
トの項目を参照。
LB/Amp/Araプレート8枚 (+DNA・LB/Amp/Ara と記入):
Araとは アラビノースの添加を示す。 LB/寒天粉末
10.5gを蒸留水300mLに溶解し、 オートクレープ処理
(120℃, 20分) した後、寒天が固まらない程度に冷まし
てからアンピシリン30mgを加えて混ぜ 200mLをプ
レート16枚に分注する(LB/Amp プレート)。 残りの
100mLにアラビノース600mgを加え、プレート8枚に
分注する (LB/Amp/Ara プレート)。
② 何も記入されていないLBプレート8枚に大腸菌を含む
液を添加して プレート全体に薄く広げて37℃℃で一晩培
する。
4 24章 | バイオテクノロジー 200
2つのマイクロチューブを用意し, 「DNA」 ｢DA
と記入し、チューブラックに差しておく。
マイクロピペットを使用して形質転換溶液250μLを
チューブに加え、チューブラックごと氷上に置く。
250L
形質転換溶液
+DNA
-DNA
チューブを押したラック クラッシュアイス
事前準備で培養した大腸菌のプレートから大腸菌を少量
かき取り、両チューブに差し込んで備する。 次に
GFPの遺伝子を含むプラスミド溶液を。 マイクロビベッ
トで10μLを計り.「DNA」 チューブに加えて氷上で10
分間放置する。
冷やしている間に、次の4枚のプレートを準備する。
a. LB プレート (通常の培養プレート)/ - DNA
b. LB/Amp プレート/+DNA
c. LB/Amp プレート/-DNA
d. LB/Amp/Ara プレート/+DNA
●チューブラックごと。 42℃の恒温水槽に50秒受けたあ
とに、水上に戻す (温度調節と時間操作は正確に行う)。
この操作はヒートショックと呼ばれ、プラスミドの大
南への桜人を戻す。
水上に2分間置いたあと､室温に戻した両チューブにIB
液体培地 250mL加え。室温で10分間放置する。
■「+DNA」, ｢DNA」チューブの大腸菌液100μLを
の4種のプレートに干し、すばやく表面に広げたあと
にふたを閉める。
プレートは裏返して37℃の定温器に入れて、翌日観察す
科学研究所の研究員の現場で採取などのDNAの塩基配列
よる
などを行う。
▲培養した大腸菌
チューブに懸濁
▲プラスミドの添加
ALB培地の添加
▲大腸菌のかき取り
▲形質転換溶液の添加
▲ヒートショックのようす
▲各プレートに大腸菌を滴下す
る
注意!
3000
●本実験を行う際には、文部科学省ライフサイエ
ンスのリーフレット「高等学校などで遺伝子
実験を行う皆様へ」に従って行う。
結果・考察
FALAS
4枚のプレートの大腸菌の増殖状況を観察する。 大腸菌
のコロニーを確認後、暗所でUVランプを照射し、GFP
の合成の有無(緑色の蛍光) を確認する。
培養1日後のプレート
緑色の蛍光が確認できる
100
100
UVランプの照射のようす
①今回、実験に使用したプラスミドは、遺伝子組換えによっ
てGFPをつくる遺伝子と, アンピシリンという抗生物質
を分解する酵素を合成する遺伝子を含んでいる。 アンビシ
リンを添加したプレートに生育した大腸菌について どの
ようなことがいえるだろうか｡
②今回、実験に使用したプラスミドでは、GFPの発現には、
アラビノースが必要であることがわかっている。 このこと
を示すには、どのプレートの大腸菌のようすを比較したら
よいだろうか。
この節のポイント
遺伝子を細胞内に導入する技術は、農作物の生産などに利用されつつある。 また, GFPと呼ばれるタンパク
質は、 遺伝子が発現する場所や時期を特定するのに使用されている。
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