Question

みやび

セミナーのバイオテクノロジーの問題です。問5が分かりません。

RT ーー寺

9 捕の玩本29

皿是

切212. バイオテクノロジー 條の文生を談み、下の各胃
TCR送では, DNA ポリメラーゼ。 プライマーと呼ばれる知い 1 本希DNA_ 針避となる

2本希DNAL 4 程頻の塩基をもつメクレオナドが必要である。DNA ポリメラーセは。プ

ライマーのすず末綴に鋳型 DNA の者共配列と相補的な塩基をもつスクレオチドを付加する。

ただし。n角型となる 2本捉 DNA を 1本句にする多必反記が必要である。 サンガー法と

呼ばれる DNA 断寺の塩基配列決宮法は DNA ポリメラーゼを用いる DNA 複反応で

るが通常の4種類のヌメクレオナドに加えて。 新たに合成された DNA に取り込まれると

以降の DNA 合成を止める特殊なヌメクレオチ ドを加える必要がある。たとえば, アデニン

をも特殊をヌクレオチ ドを少量加えた反応液では, きまざまな信所で特殊をメクレオナチ

ドが取り込まれで DNA 合成が停止する。同様に。 他の3 種の塩基についてもる特珠なスク

レォチドを加えて別々    させる。 その後、 。 4 種類の反忠流を電気泳動し。DNA 断

上の涼動パターンから鋳型 DNA の境基配列を決定することができる

回PCR で好導細商の DNA ポリメラーゼが公用きれる理由を30季以内で記せ

問2. PCR により. 次に示した DNA が映幅された。PCR に使用した2 種類のプライマー
の塩基配列を 5側を左にして記せ。ただし。プライマーは10塩基からなるものとする。

5『ーCATAAACOCCGATGCACCCCGATGCACCCCAGTCCAACGGACGATCTCGAGGACTTCAす

すずー6TATTTGGGGCTACGTGGGGCTACGTGGGGTCAGGTTGCCTGCTAGAGCTCCTGAAGT5

問3. PCRで2本鎖DNA を1 本争にする理由を30字以内で記せ。

問4 . 下線部について 図 1 は, ある DNA 断片
を増幅する際の反応温度の時人化の一部を示し
たものである。 変性反応に相当する部分を図中の
アーウから選べ。

骨5.下数部について。図2は。 4種類の反応
を異なるレーンで電気動した結果である。この
DNA 断庁の泳動パターンから, 涼動きれたDNA
の塩基配列を5備を左にして記せ。

則6. 図2と同じ区決定実
をくり返したがddC だけを加え
るべき反応液に,誤っでddT も
加えで反応を行った。この失敗に
気づかず, 電気涼動した場合,較
2にはないDNA のパン ドが現れ

、 だな。 2回の突馬で新たに現れる

 

えよ

212. バイオテクノロジー

が人選でも変性
陣中! 時近が記で

癌2. CTAMACCCC,
TGAAGTCCTC

しgいタンバク買でできているから。(263

とDWA ポリメラーゼのMsできるようにずるたの。 os。
瑞イ

5、ACGTCGAMTGGA

前6

レーン 1(GdCを加えた反応液)
レーン 2(ddGを加えた反洪)
レーン 3(GdTを加えた反応液)
レーン 4ddAを加えた反記池)

 

電動の向き

問 一フに。 本奈を構成するタンパク質は商温では変性し失活してしまう

し。周失のような益の昌焼に生息する好導納では。 高富でも衣性しなvm
素を6っている。 95Cのような高明にすることが必要な PCR(ポリメラー
6)送では。聞続して反応を行うために高温でも失活しない DNA ポリメラー
を用いる。

用2 、DNA ポリメラーゼは。 DNA のメクレオナド名を$仙から ゞ出の方にUp
人成できない。 したがって, プライマーは。 2 本頒 DNA において夫較したい

域の仙の交にそれぞれ結合するように作成されている。これは。    マー#
甘合する痢分と相補的に結合している DNA のヌメクレオナド狂の塩基配列に
する。この則是では10才基指定されている。また、間題文に5備をたにしてき
くように指示してあることに注意する。

同3 PCR法では, 2 本鎖 DNA それぞれに。  プライマーを相補的な塩基配列の
に合きせる必要がある。ブライマーを相拉的に結合きせるためには。 2
TDNA の者碁どうしの結合を切って1 本句にする必要がある。

周4. 変性反応とは。  DNA の2 本鎖が1 本鎖に解玖する反応のことである。 者
9上すると DNAの2本名の和合が切れて 1 本ずつのメイ|
2に放する。 説いて没を50C60Cに下げての プライマーをスク
は での造度を約72Cに上げ(7 DNA ポリメラーの時

つて, プライマーに続くヌメクレォナトド)         ご     前
ON 流させる。 これをくり
了96NESRDSA クレオナドを加えて DNA を合成させる。 この

ジアオキシメクレォナトド        >      メッレオ
は。 アオォキシリホースの3       時れる。 ジアォキ      4

る                  (の素に絡合しでいる OH がHに
り 夫人加れるメクレォナドのリ ン陵と結合することができない。 ご

Answer 1

✨ ベストアンサー ✨

Mirock

複製(DNA合成)するときにddA,ddT,ddG,ddCがつくと複製は止まると言うことを頭に入れておくと、

A,T,G,CとddA,ddT,ddG,ddCがあるとき、
A,T,G,Cが普通につくときはそのまま繋がっていくが、ddA,ddT,ddG,ddCが付いてしまったとき途中で複製は終わってしまう。

例えば
ATGCという塩基配列がある、
A,T,G,CとddA,ddT,ddG,ddCを使って複製した場合
相補的に書くならばTACGですが
ddA,ddT,ddG,ddCを組み込むと
ddTで終わり
TddAで終わり
TAddCで終わり
TACddGで終わり
というようなDNA鎖ができるはずです。
電気泳動では分子の短いものが遠くまで動くので
DNA鎖の短い順に末端だけ並べると
ddT
ddA
ddC
ddG
なので答えがTACGだと分かります。

今回の問題もそのように考えると
遠くにあるものから順に塩基を書くだけです。

みやび

ddAとかddTとかddGとかddCっていったいなんなんですか？

Mirock

解説に書いてあったと思いますが、

基本的にはATGCと同じ構造なので、
塩基と同じ働きをします。AにはT、CにはG。

しかし、
次の塩基が繋がるためのOH構造がないので、
DNAの合成が止まります。

構造式や結合の話になるので、化学をやっているのであれば、構造式を調べてみるといいかもしれないですね。
ただ、ddAなどがわからなくても、それが付いた時点で合成が止まることだけ分かっているなら十分だと思います。

みやび

なんとなく分かりました！ありがとうございました。