ページ3:

Moller 染色
○芽胞染色であり、加温染色である
○主な目的菌はBacillus 属、Clostridium属
○使用色素は塩基性フクシン
染色手順
クロス酸水溶液(媒染) Ziehtの石炭酸フクシン液(加温)
→硫酸水(脱色)→Löfflerのアルカリメチレン青液
染色 結果
芽胞:赤色
菌体:青色
Wirtz 染色
0
芽胞染色であり、加温染色である
○主な目的菌はBacillus 属、Clostridium属
○使用色素はマラカイト
染色手順
マラカイト緑液(加温)→サフラニン液
染色結果
芽胞:緑色
歯体:赤色
Hiss 染色
○莢膜染色で加温染色である
○主な目的菌は Streptococcus pneumoniae, Klebsiella pneumoniae
Haemophilus influenzae, Bacillus anthracis
・使用色素はフクシン液またはゲンチアナ楽(クリスタル等)
染色手順
フクシン液またはゲンチアナ液(加温)→硫酸銅水溶液(脱色)
染色結果
莢膜:淡紫色(ゲンチアナ紫)、淡赤<ピンク>色(フクシン)
菌体:濃紫色(ゲンチアナ紫)、濃赤(赤)色(フクシン)

ページ4:

Letfson 染色
○革便化染色で、検体にホルマリン固定を行う
○目な目的菌は有鞭毛菌(緑膿菌、腸内細菌など)
○使用色素は塩基性フクシン
染色手順
ホルマリン固定した菌液塗抹標本を色素液(パラローズアニリン+タンニン酸)
で染色
染色結果
華毛、菌体ともに濃赤色
ziehl-Neelsen 染色
・抗酸菌を目的とした染色法で加温染色である。
○主な目的菌は Mycobacterium属
0
使用色素は塩基性フクシン
染色手順
3%
ziehlの石炭酸フクシン液(加温)→塩酸アルコール(脱色)
→Löfflerのアルカリメチレン青液
染色結果
抗酸菌:赤色
背景その他:青色
Neisser 染色
□Corynebacterium diphtheriaeの異染小体を目的とした染色法
○主な目的菌はC.diphtheriae
○使用色素はNeisser液(メチレン青、クリスタル紫)
染色手順
Neisser液 クリリイジン液
染色結果
異梁小体:黒褐色
菌体=黄色
1

ページ5:

0
Gimenez染色
Legionella属を目的とした染色法
○使用色素は塩基性フクシン
染色手順
石炭酸フクシン液 マラカイト緑液
染色結果
レジオネラ菌に赤色
背景その他:青色
抗酸菌 覚えるべきもの
○結核菌(Mycobacterium tuberculosis)
→Ziehl-Neelsen染色で赤色
○らい菌(Mycobacterium (eprae)
○非結核性抗酸菌(NTM)
Mycobacterium arium
Mycobacterium intracellulare
-7 MAC (Mycobacterium avium complex,
Mycobacterium kansasit
○ノカルジア(Nocardia asteroides
弱抗酸性、染まりにくい、土壌菌、日和見感染
芽胞形成菌覚えるべきもの
○炭疽菌(Bacillus anthracis)
→莢膜あり
○ボツリヌス菌(Clostridium botulinum)
→神経毒素(ボツリヌス毒素)
○破傷風菌(Clostridium tetant)
→神経毒素(チタノスパスミン)
○ウェルシュ菌(Clostridium perfringens)
→α毒素

ページ6:

滅菌法
・高圧蒸気滅菌(オートクレーブ)
滅菌条件:121℃15分
滅菌対象:ガラス器具、金属製品、磁製品、培地、試薬、紙
繊維製品など期OK
乾熱滅菌
滅菌条件:高温(160℃~180℃)
芽胞OK
滅菌対象:ガラス器具、金属製品、磁製品、鉱油、粉末など
エチレンオキサイドガス滅菌(EOG滅菌)
滅菌条件:エチレンオキサイドガスを直接流通させることによって、
微生物を殺滅する
滅菌対象:高圧蒸気滅菌ができないもの
ex) プラスチック、ゴム製品など芽胞OK
濾過滅菌
-0.22μm以下
滅菌条件・濾過装置としてメンブランフィルターや磁製フィルターが
用いられ、微生物を除去する
滅菌対象:気体、水、可溶性で熱に不安定な物質を含む試薬や
培地など芽胞NG
その他滅菌法
火炎滅菌、煮沸消毒、過酸化水素ガスプラズマ滅菌
放射線滅菌、紫外線殺菌
滅菌と消毒の違い
滅菌はすべての微生物を完全に死滅させる(芽胞ふくむ)
消毒は病原性のある微生物を減らす

ページ7:

消毒法
○高水準:接触時間が長ければ、病原性のある全ての微生物を
殺滅できる
短時間では大量の芽胞を除いて、全ての微生物を殺滅
主な薬剤→グルタルアルデヒド(グルタラール)、フタラール、過酢酸など
○中水準:ほとんどの病原性のある細菌、真菌を殺滅し、ウイルスを不活化
しかし、弊胞は殺滅しない
主な薬剤→ポビドンヨード、エタノール(消毒用エタノール)、次亜塩素酸ナトリウム
クレゾール石けんなど
○低水準=結核菌や消毒薬に耐性を示す細菌を除いたほとんどの
栄養型細菌、一部のウイルス、一部の真菌を殺滅する
主な薬剤→グルコン酸クロルヘキシジン、塩化ベンザルコニウム(逆性石けん)
両性界面活性化剤など
。
ウイルスの特徴
・細胞構造をもたない
30861
○自己増殖できない→宿主細胞内でのみ増殖
○抗菌薬は無効
○核酸(DNA orRNA)
・カプシド(タンパク質)
○エンベロープ(あるもの/ないもの)
トフエンベロープありはアルコール・界面活性剤に弱い
エンベロープなしは次亜塩素酸ナトリウムが有効
プラスミドの特徴
0
細菌がもつ環状DNA
○染色体とは別
○生命維持には必須でない
0
b
薬剤耐性遺伝子をもつ
接合伝達で他菌へ移る

ページ8:

原核生物と真核生物の違い
原核生物。
○核膜はない
○環状DNA
0
細胞内小器官はない
○リボソームの沈降係数は70S
○細胞壁をもつ(Mycoplasma, Ureaplasmaはもたない)
○細胞壁の基本成分はペプチドグリカン (Chlamydia, Chlamydophila)
○分裂様式は二分裂
真核生物
○核膜がある
○線状DNA
○細胞内小器官がある
○リボソームの沈降係数は80S
○細胞壁をもつものともたないものがある
○細胞壁の基本成分はキチンとセルロース
0
分裂様式は有糸分裂
原核生物と真核生物のリボソームの違い
はない
原核生物 70S
リボソーム RNA(サブユニット)
505 235, 5S
真核生物 805
40S
30S 16S
60S28S,5.89,5S
18S

ページ9:

抗菌薬
○細胞壁合成阻害薬
→B-ラクタム系
°
・ペニシリン系:ペニシリンG、アンピシリン、アモキシシリン、メチシリン
ピペラシリン
カルバペネム系:イミペネム、パニペネム、メロペネ
モノバクタム系:アズトレオナム
ペネム系
ファロペネム
・セフェム系:セファロスポリン系(第1、第2,第3、第4世代)
セファマイシン系、オキサセフェム系
→グリコペプチド系:バンコマイシン、テイコプラニン
→ホスホマイシン系:ホスホマイシン
セフェム系第1~第4世代
第1世代:セファゾリン、セファレキシン
第2世代:セフォチアム、セファクロル、セフメタゾール
第3世代ニセフトリアキソン、セフォタキシム
第4世代:セフェピム
○タンパク質合成阻害薬
マクロライド系:エリスロマイシン、クラリスロマイシン、アジスロマイシン
アミノグリコシド系:ストレプトマイシン、カヤマイシン、ゲンタマイシン、アミカシン
テトラサイクリン系:テトラサイクリン、ドキシサイクリン、ミノサイクリン
リンコマイシン系:クリンダマイシン
クロラムフェニコール系クロラムフェニュール
オキサゾリジン系:リネゾリド
グリシルサイクリン系チゲサイクリン
ストレプトグラミン系=キヌプリスチン・ダルホプリスチン
○核酸合成阻害薬
ニューキノロン系:オブロキサシン、シプロフロキサシン、レボフロキサシン
リファンピシン
○葉酸合成阻害薬
スルファメトキサゾールナトリメトプリム
ダプソン