Undergraduate
生命科學與醫學
大學丨國考科．臨床血清免疫學
15
531
0
大啊好！！
喜歡ㄉ動動小手收藏按愛心ㄅ💗
有不懂的地方也歡迎提問！
食用指南👇🏻
基礎免疫學請參考《免疫學》的筆記歐
Clear note 頁碼
18之前是免疫學
19-30: 臨床相關檢驗與微生物免疫
30-39, 46-47: 免疫相關疾病
40-42: cytokine
43: HLA
🚫其中有些圖片來自於老師上課ppt 真正圖源應是原文書（本人也僅是為了學習方便方才截圖使用，大部分手繪圖片也從原文書圖片描圖而來）僅供筆記閱讀 尊重智慧財產權 嚴禁再度散播或任何營利商業用途！！
ノートテキスト
ページ1:
Titer 力價、效價 . 為抗體的相對濃度 . 證明抗體依然表現時血清的最大稀釋度的倒數 血清學診斷 * Serial dilution: 血清會加入等量 saline 進行兩倍序列稀釋,觀察仍產生反應的最大稀釋度 結果判讀 1. Seronegative 缺乏疾病的抗體證據 Seropositive Seroconversion 血清學測試證明血清中出現抗體 特異性抗體(一)→(+) 血清轉換 血清中特異性抗體需要時間產生足夠大量,大於抗原分子的數量才能被檢測出 2. 解釋方式 Qualitative 定性 Semiquantitative 半定量 1 (一) negative (±) weak positive ② (NR)non-reactive (WR)weakly reactive ① (+)positive (R)reactive 梅毒血清報告不顯示陰/陽性→顯示有/無反應 (螺旋體科交叉反應嚴重,麻疹、B,C肝感染亦交叉影響) Titer:顯示血清稀釋倍數nX(+)或1:n(+) 血清學診斷 Quantitative 定量 3. 抗原抗體 interaction ① 描述抗原抗體間的力量 表示為ug/ml等,需使用儀器分析 Affinity 吸引力 單個抗原表位(epitope)與抗體上單個抗原結合位的結合能力 -所有抗原表位與整個抗體分子的結合能力 能更好的衡量生物體內的抗原抗體結合力 抗原性 Antigenicity Avidity 親和力 ② 抗原性/免疫性 免疫性 Immunogenicity 抗原或其表位能被BCR, TCR 識別,誘導 免疫反應 . 分子量過小,無法被BCR, TCR 識別,必須與載體結合才 能刺激免疫應答 具有免疫性的物質必定具有抗原性 • 具有抗原性的物質不一定具有免疫性 抗原 hapten ③ Cross reactivity:抗體與其不對應的抗原產生反應(此抗原與抗體的對應抗原性質相似) ④ Heterophile antibodies 嗜異性抗體: →與基因無關的外來抗原誘導產生的Ab與自身結構相似的Ag反應 e.g. 傳染性單核球增多症中EBV 抗體與 sheep RBC 反應 Streptococcus 的 M protein 產生自體免疫反應,導致風溼性心臟病 ⑤ Ab-Ag reactions k₁ Ab + Ag = Ab - Ag k2 Association constant 親和常數 Kg = [Ab-Ag] K₁ = k2 [Ab][Ag] =K Dissociation constant 解離常數 Ka = [Ab][Ag] 1 ky [Ab-Ag] Ka 1
ページ2:
Immune System 4. Types of immunologic reaction Primary reactions Secondary reactions Tertiary reactions RIA 放射/EIA 酵素/IFA 螢光 免疫分析 HA(hemagglutination), CFT (complement fixation test), LA 趨化、調理、免疫貼附 2
ページ3:
Innate Immunity Innate immunity △先天免疫包含兩種主要反應:inflammation (活化聚集 WBC,血漿蛋白), antiviral defense (NK, IFNs 介導) 識別病原體 1. 識別結構:Pattern recognition receptors (PRRs) 模式識別受體:先天免疫的受體 Pathogen-associated molecular patterns (PAMPs) 病原相關分子模式 -由傳染源(病原體)表現,同一類型的微生物共有 . -e.g.細菌細胞壁的寡糖、peptidoglycans,脂多醣 Damage-associated molecular patterns (DAMPs)損傷相關分子模式:由受損、壞死細胞表現 2. Cellular receptors Innate immunity • Adaptive immunity 由生殖細胞系編碼,在所有細胞中皆存在 (share same lineage) 特異性針對不同的 PAMPs 由體細胞重組產生的gene編碼,僅在 B, T cell 中 (多樣性較高) 有多種受體,但相同受體間不存在差異 健康個體皆具有區別自我非我的功能 特異性針對微生物分子(Ag),可辨識非微生物抗原 僅有兩種(Ig, TCR),但每種有大量變異 Toll-like receptors (TLRs) 位置 細胞 配體 細胞 胞內體膜 DC,吞噬細胞, B cell, 內皮細胞等 細菌 LPS,肽聚糖 病毒核酸 NOD-like receptors (NLRs) (Nucleotide oligomerization domain) 胞質 吞噬細胞、上皮細胞 細菌細胞壁肽聚糖 RIG-like receptors (RLRs) 胞質 吞噬細胞 病毒 RNA Cytosolic DNA sensors (CDSs) 胞質 多種細胞 細菌、病毒DNA CLRS 細胞膜 吞噬細胞 微生物表面糖類、細胞壁 其他可溶性受體: pentraxins, collectins, ficolins, complement | Extracellular Microbial Bacterial cell- wall lipid Toll-like receptor (TLR) -polysaccharide C-type - lectin receptor Cytosolic NOD-like receptor (NLR) RIG-like receptor (RLR) 、Bacterial cell wall lipid; products of damaged host cells -Viral RNA Cytosolic DNA sensor (CDS) - Microbial DNA 4 | Endosomal TLR wwww Plasma membrane Nucleic acids of ingested microbes Mar 000000 Endosomal membrane
ページ4:
(1) Toll-like receptors (TLRS) ① 受體位置與結合 ligand Innate Immunity 細 G(+)細菌 G(-)細菌 flagellin 胞 lipopeptides peptidoglycan LPS 膜 TLR-1:TLR-2 TLR-2:TLR-6 TLR-2 TLR-4 TLR-5 胞 內 dsRNA TLR-3 SSRNA CpG DNA TLR-7 TLR-8 TLR-9 體 結合dsDNA virus 膜 *不結合 MyD88 結合 ssRNA virus 與 bacteria, DNA virus 的未甲基化 DNA * ② 信號傳遞與功能 TLR 上的 Leu rich repeats 與微生物分子作用 ↓ 信號結構域 TIR 召集 proteins 活化轉錄因子 (MyD88-IRAK1/4→IKK NF-κB) 急性發炎、刺激後天免疫 抗病毒 NF-kB 增強 cytokines,黏附分子, 共刺激因子表達 Interferon regulatory factors (IRF)刺激產生 IFNa, B (2) NOD-like receptors (NLRS) Subfamily Ligand NLRA IFN-Y NLRB (NAIP) Flagellin Function class II MHC Inflammasome Flagellin 活化 IL-1, IL-18→引發細胞 pyroptosis 焦亡 NLRC NLRC4 結合第三型分泌系統 (NOD1, 2, NLRC3-5) DAP (NOD1) 活化 NF-KB MDP (NOD2) 胞外 ATP,細菌 toxins, ROS 活化 NF-KB,細胞自噬,產生IFN-a, B Inflammasome NLRP (NLRPS 1-10) NLPR7 Lipopeptides 活化 IL-1, IL-18→ 引發細胞 pyroptosis 焦亡 * inflammasome NLR+ adaptor+caspase-1 • Bacterial products ●晶體、活性氧物質 →形成發炎體 → caspase-1 活化 刺激 ●K+流出細胞 pre IL-1 gene pro-IL-1ẞ (3) Cytosolic DNA and RNA sensors - RIG-like receptors (RLRS) 分泌IL-1B→急性發炎 - Cytosolic DNA sensors (CDSs):促使IFN gene 轉錄→ type I IFN 釋出,誘導抗病毒 (4) C-type lectin-like receptors 5
ページ5:
Innate Immunity 先天免疫的組成 1. Epithelial barriers: . 物理屏障 locally antibiotics 殺死微生物 Lysozyme Secretory phospholipase A2 Defensins - 一種 glycosidase,可破壞 peptidoglycan (切割 ß-1, 4 linkage,破壞細胞壁) Gram(-)表面有LPS, lysozyme 較無法作用 Epithelial cells, Paneth cell 產生 -一種高鹼性酶,可進入細菌細胞壁,水解細胞膜的磷脂 Epithelial cells, Paneth cell 產生 -短陽離子肽,有3個雙硫鍵 可破壞細菌、黴菌的細胞膜、病毒的 envelop (插入 membrane 形成孔洞) 3 subunits • ·a-defensin:腸道 panth cell, neutrophil 產生 • ·B-defensins:腸道外的 Epithelial cells 產生(泌尿道、skin 等) e-defensins : Cathelicidin 抗菌肽 可破壞微生物細胞膜 . Histatins 組胺素 Lectins 凝集素 上皮細胞、skin 的 keratinocytes 發炎時由 neutrophil, macrophage 產生 以無活性 propeptide 儲存在 neutrophil 次級顆粒,顆粒與吞噬囊泡結合後被切割釋出 富含 histidine 的陽離子肽,由口腔的腮腺、舌下腺、頷下腺產生,抵禦眞菌 Paneth cells 產生 REG-3 y (C-type lectins),與肽聚糖表面結合,抵禦gram(+)細菌 Intraepithelial lymphocytes 殺死微生物或受感染細胞 2. Complement system . • ·Inflammation:C3a, Ca Phagocytes:C3b 切割活化 MBL Pathogen MASP-11C MASP-2 切割2 切割C C2b Cza 膜穿孔:C5-9 形成膜攻擊複合物 MAC ① Lectin pathway: C4629 一種 mannose-binding lectin (MBL)+3種ficolins,識 別微生物表面碳水化合物4種模式受體 C₁ Cya 硫酸 产品(46露出thioester microbial C39-312 inflammation. Cab → pathogen *MA ② Classic pathway: 啟動的分子:C1 complex C1q 可結合抗體 Fc region,將補體功能與適應性免疫結合 • C3b, C4b:與附近任何蛋白、醣類形成共價鍵 部分 C3b, C4b 可連結抗體,觸發吞噬 • C3b 僅調理被補體活化的表面 C1&pathogen → Cir p½ c₁ ↓ CIS A 切割4? C49 C3 JC4b 'C3b, C4b 若沒有與附近病原共價結合會立即水解失活 ↓ C4629→ +PJ Cz. 029 Csa Cib →避免補體擴散至身體細胞 ③ Alternative pathway: . 可自發活化,由 alternative pathway C3 convertase, C3bBb 參與 壽命短,依靠 factor P 穩定 血漿 protein factor facer B by enzyme. 活化厂lectin/dasical途徑中產生的Cib結合 factorB後又結合faaro Ba C3b Bb C37 → (3 (420) 745 factors factorD→ Ba 6 → C3 viz+) Bb.
ページ6:
3. Phagocytes Innate Immunity Neutrophils ● 來自造血幹細胞 HSC • 在組織中壽命約1-2天 反應速度快 -受刺激後快速做出反應,快速吞噬微生物 — Degranulation 釋放酵素(主要功能) -快速聚積吞噬細胞氧化物→respiratory burst (1)M發育 . Macrophages • 來自 HSC, tissue-resident M,胎兒卵黃囊/肝臟 壽命幾天~幾週,tissue-resident Mo壽命可達數年 反應速度較遲緩 -較晚才進行反應,反應可能取決於 new genes 轉錄 - 釋放大量 cytokines -誘導iNOS轉錄活性 ・Adult:HSC 發育出單核球、DC precursor →monocyte→在組織中變爲 macrophage 並活化 Early development:胚胎造血器官、骨髓產生HSC→ tissue-resident M♭ → 分化前往各處組織 (2)M上的 phagocytic PRRs C-type lectin-like receptors ① Mannose receptor:辨識細菌、真菌、病毒中的 mannosylated ligands ② Dectin-1:辨識 fungal cell wall 上的 glucose 聚合物 Complement receptors (CRs), FcRs 結合 C'-coated 的或表面結合抗體的微生物 • 促進多種微生物的吞噬作用 1 mannose complement receptor M receptor 不同組織中的 macrophages 肝臟:Kupffer cells Skin:Langerhans cells - 結締組織:histocytes Fc receptor Dectin-1 ②(B-glucan receptor) 肺臟:Alveolar macrophages 腎臟:Mesangial cells - 神經:Microglia cells (3)M活化與功能 ①發炎、增強後天免疫 lipid receptor scavenger receptor Scavenger receptors 清道夫受體 辨識多種陰離子聚合物、acetylated LDLs,由 6 種不同的分子家族組成 ③ Class A SR:含有 collagen domain 三聚體的膜蛋白,結合細菌、 病毒的細胞壁成分,協助內吞細菌 e.g. SR-AI, SR-A II, MARCO ④ Class BSRs:結合HDLs,內吞其 lipids e.g. CD36 微生物結合 TLR →分泌TNF, IL-1, IL-6, IL-12 → Inflammation, adaptive immunity ↑ ② 殺死微生物 ·補體受體→吞噬微生物、產生iNOS ·Cytokines 受體→吞噬氧化→ROS (4)M 分類 Classical Mo, M1 Macrophage 受IFN-Y刺激形成 M1 -分泌IL-1,IL-12, IL-23 等 →inflammation - ROS, NO, lysosome 酵素 → killing Killing of microbes Alternative Mo, M2 Macrophage 受IL-13,IL-4 刺激形成 M2 -分泌IL-10,TGF-B, arginase →抗發炎、傷口修復、fibrosis iNOS Arginase1 NO L-Arg Ornithine 7
ページ7:
Innate Immunity 4. Dendritic cells (1)發育 ·Adult Common DC precursor HSC Common lymphoid precursor Monocyte precursor In peripheral blood + In tissue *pre-classical DC → classical DC → CDC1, CDC2 plasmacytoid DC monocyte → monocyte-derived DC ·早期發育:胚胎造血器官 → fetal tissue macrophage precursor → Langerhans cell (in skin) (2) Cell subsets monocyte- CDC2 cDC1 plasmacytoid DC derived DC Langerhans cell 表達 High level TLR1, Surface Marker: CD11c CD11c CD11b CD11b TLR9 產出的 | cytokines 「許多種,包括IL-6,IL-23 IL-12 Type IIFN 多種 - 先天免疫:產生 cytokines | 後天免疫:將抗原 抗病毒反應 分泌 cytokines 同 CCD2 | cross-presenting 給 主要功能 -後天免疫抗原呈現給 CD8+、誘導 Th1 反應 CD4+ 5. Innate lymphoid cells (ICLs) *tissue-resident cells,產生的 cytokines 與 Th相似,不表現 TCRs *與 CD4+分化的亞群 Th1, Th2, Th17 轉錄因子、分泌效應分子、功能一致(共同的效應模組) ICL1 ICL2 ICL3 轉錄因子 T-BET GATA3 RORyt 發育過程 受IL15, IL-7 刺激 受IL-7 刺激 受 IL-7 刺激 活化過程 釋出的效應分子 效應功能 受IL-12, IL-15, IL-18 刺激 IFN-Y 受 IL-25, IL-33, TSLP 刺激 IL-5, IL-13 受IL-1B, IL-23 刺激 IL-17,IL-22 胞內病原清除(antiviral) IL-5 促進 eosinophil 分化 胞外病原清除 →與過敏、抵抗寄生蟲有關 6. Nature killer cells (1) NK cell 與 CD8+有相同效應模組,與ICL1 發育相關,不表現 receptor Igs, TCRs (2)受macrophage 釋出的 type 1 interferon 活化 (3)辨識:無 TCR,依靠先天免疫受體 (4)效應功能: ① Killing 與 CD8 T cell 相似:germline-encoded receptors 辨識標的細胞,釋出穿孔素、顆粒酶 透過 TRAIL ( TNF 相關凋亡誘導配體),識別 DR4, DR5 活化 caspase 8引起凋亡 ADCC:NK 表達 Fc receptor,結合抗體,釋放顆粒 ② 活化 Mo:分泌 Mo-activation cytokine IFN-y, TNF-a 等活化 M (5) Regulator:NK 表達 Activating/inhibitory receptors →inhibitory receptor 遇到正常細胞會被 MHC-I 抑制,卽使結合 activating ligand 也不被活化 →受感染的細胞抑制 MHC-I → inhibitory receptor 不參與→ killing Activating receptor NK cell · Inhibitory receptor 8 Activating. ligand for NK cell Normal cell Self class I MHC-self peptide complex
ページ8:
7. Mast cells ① Granule 胞吐→釋出血管活性胺、蛋白酶→血管擴張、平滑肌收縮、tissue damage ② 酵素修飾花生四烯酸→分泌前列腺素、白三烯(leukotrienes)→血管擴張、平滑肌收縮 3 cytokine gene cytokines→ inflammation (leukocytes) 8. Cytokines of innate immunity (1) Cytokines (2) Cell Adhesion Molecules (CAM) ①Selectins (CD62) L-selectin E-selectin 在 leukocyte 上表達 Ligand: MAdCAM-1; Innate Immunity P-selectin 在 platelet,內皮細胞上表達 Ligand: PSGL-1 由 cytokines 誘導內皮細胞上表達 Ligand: ESL-1(Sialy Lewis X) GlyCAM-1, CD34 (Sialy Lewis X) ② Integrins:結合胞外基質與細胞黏附分子,strong adhesion Integrins VLA-1, 2, 3,6, aẞ1, α6ẞ4 laminin VLA-4 (α4ẞ1) Ligands Fibronectin, VCAM-1 LPAM-1(α4ẞ7) LFA-1(αLẞ2) MADCAM-1 ICAM-1, ICAM-2 3 Ig superfamily • ICAM-1: LFA-1 ligand . . . • 免疫反應機制 VCAM-1: VLA-4 的ligand,在內皮細胞表達 MADCAM-1: L-selectin, VLA-4, LPAM-1 leukocytes 3 PECAM-1:在內皮細胞、血小板、單核球、中性球、T細胞上表達 NCAMs: 在神經元表達 Leukocyte extravasation Rolling 黏附分子: Selectin Activation WBC chemokine 1 (CXCL8, CCL2) Adhesion 黏附分子: - Leukocyte: integrin, LFA-1 - 內皮細胞: ICAM-1 9 Migration
ページ9:
Adaptive Immunity Ag capture and presentation 1. APC 捕捉蛋白質抗原 Adaptive immunity 蛋白質 Ag 進入體內→被DC捕捉,遷移、活化→聚集在周邊淋巴組織,呈現給 naive Tcell→ 免疫反應 2. APC:不僅呈現抗原,也表達其他信號分子活化 T cell 3. MHC 的結構、特性與功能 *Major histocompatibility complex (MHC)由 ch6 短臂上的 HLA gene 編碼,分成 I~III 三個亞群 MHCI MHC II 結構 Class I Molecule Peptide-Binding Cleft Class I Molecule 98 Molecular feature · Highly polymorphic 高度多態性 Gene feature · Co-dominantly expressed 共顯性 • MHC 分子僅結合 peptide 成分,且一次僅呈現一個 peptide 分子 • 廣泛特異性:同一個 MHC 分子可結合許多不同的 peptides ● 可呈現來自不同細胞腔室的 peptide • 結合 peptide 的 MHC才能穩定表現在細胞表面,且不易解離,能呈現數天 表現的細胞 All nucleated cells DCs, phagocytes, B cells, 上皮 or 內皮組織 Cytosolic protein Extracellular protein 呈現的 細胞自身物質 . 內化在 endosome, lysosome 中 peptide 來源 病毒感染的物質 由CD8+響應 結合 peptide 的位置:ER →由CD4+響應 . 結合 peptide 的位置:胞內小體 呈現過程 • 由 TAP 協助運輸 peptide 進入 ER • 與 li clip 結合穩定運輸空的 MHC || CD4+響應分泌 cytokines Functions CD8+響應殺死APC . 活化 M$ 殺死被吞噬的微生物 • B cell 分泌 Ab 10
ページ10:
Adaptive Immunity 4. 抗原呈現的過程 ① MHCI Ubiquitin-proteasome pathway - Protein 結合 ubiquitin 分子,被泛素化 - 輸入 proteasome 降解成短肽輸出 (IFN-y 可使 protein 與其他蛋白酶體結 合,加快輸出速度) ② MHC II Extracellular protein 胞吞進入細胞 TAP transport into ER TAP 介導 ATP-dependent 的 peptide 跨膜運輸 ER 合成 MHC II (結合li穩定) In vesicle 合成、呈現 Peptide 結合 MHC 分子後 離開ER,傳送到細胞膜 結合、呈現 Peptide, MHC II vesicles Lysosome, endosome 中的酵素 分解 protein ③ Follicular DCs (FDCs) Peptide in endosome 結合形成 MHC II 分子 後傳送到細胞膜 . ,不源於BM,由間充質 mesenchyme 生成,定居在LN 或脾臟的中 B cell-rich lymphoid follicles 表達的受體結合 Ag(被Ab或補體副產物 C3b, C3d覆蓋),呈現給B cell→ 不表達 MHC 分子 ④ 淋巴竇中的Mo、濾泡附近的DCs:表現完整的、未經加工的抗原給濾泡中的 B cell 受體結合抗原呈現給 B cell →B cell 在 germinal center (生發中心)中增殖→回到FDC附近接受新的抗原刺激 辨識抗原:抗原受體 BCRs, Abs (Igs) Function ① 作爲 B cell 表面受體 BCRs辨識抗原 TCRS T cell 的膜結合受體 ② Plasma cell分泌的糖蛋白,作為體液免疫的效應分子 ③ Fc region 決定 Ig 類型 . 不被分泌 . H s-s bond 不作為效應分子 IgA 可形成 dimer,有IgA1, 2亞型 α B - 黏膜免疫 名 Fab region IgD Naive B cell 的抗原受體 IgM 五聚體形式 Hinge region. C Fe region – Naive B cell 的抗原受體 活化補體 無 hinge region IgE 抵禦寄生蟲、介導過敏反應 富含 Pro 的結構 無 hinge region Hinge region: CH1, CH2 間 a: chromosome 14 IgG Subclass1-4 B: chromosome 7 Diversity 訊號功能 血清濃度最高,半衰期最長 - 調理、活化補體 − ADCC (抗體依賴性細胞介導細胞毒殺) Heavy chain: chromosome14 Light chain: K (chromosome 2), 入 (chromosome 22) 每個 clone 有各自的單一特異性,Abs 有近101/TCRS 有近1016種獨特的特異性 與之相關聯的 protein 介導訊號功能: Ig附近的Iga, lg (CD79),TCR 附近的CD3, 可辨識可溶性抗原 ●構象異構 or 線性表位皆可 • MHC 呈現的 peptides, lipids · 線性表位抗原 識別的抗原 ・大分子(蛋白質、多糖、脂質、核酸)、微小化學物質 抗原結合位 Affinity 結合可變區的三個 CDR (complementarity-depending regions,互補決定區) 在免疫反應期間對於蛋白質抗原的 affinity 會增加 結合/解離率 結合快速,幾乎不解離 結合、解離皆慢 Affinity 較 Ig 小,不變 11
ページ11:
Adaptive Immunity 淋巴細胞發育 1. 發育過程 *受體產生爲分子過程,不受受體辨識影響,且辨識只在受體產生/表達後發生 ① BM 中的幹細胞產生大量含有不同受體的 lymphocyte progenitors ② Progenitors 增殖 ③ 抗原受體基因 rearrangement,表達 ④ Selection Pro期:尙未獲得特異性標記 Pre期:受體編輯, 形成immature B, T cell 2.產生抗原受體多樣性 體染色體突變 B Cells - Bone Marrow IgL Gene Rearrangement Light chain重組 IgH Gene Rearrangement Heavy chain先重組 B220°CD43- Pre B Immature B B220+CD43+ Pro B B220*IgM+ Feedback & Ja D-Ju V-DJB Expansion Receptor Editing pre-BCR D-JB V-DJy Bsubunits先重組 Pro T CD4-CD8- pre-TCR Feedback & Expansion TCRB Gene Rearrangement |T Cells - Thymus Tcell 發育與重組 (Double negative) ẞ selection V-Ja Pre T CD4*CD8+ Receptor Editing TCRa Gene Rearrangement a subunits重組 CD4"or CD8" aẞ TCR Immature T positive selection (Double Positive) DNI 022 aive) (Single Positive) DN3 DN4 DP Sp pre TCR pre TCR TCR TCR CD44+ C044+ CD+5° CD+5+ 1C044+ CD+5+ CD44+ CD+5" CD8+ CD4+ CD8 CP4* TCR B.r. S rearrangements (Tra TCR a rearrangements *CD45 (白細胞共同抗原,完整的結構中包含三個 protein region: A, B, and C) Naive T cell CD45RA (僅包含 protein region A), effector/ memory T cell CD45RO (缺乏三個 protein region) Combinatorial diversity 不同 lymphocyte colonies 中 receptor 的V,D,J基因片段有不同的重組 接合多樣性 接合多樣性受到 V, D, J 片段數量限制 改變基因序列中的核苷酸,重組的V, D, J 基因片段連接不受限制 ① 移除核苷酸:移除重組過程中不需要的核苷酸 Junctional diversity 連接多樣性 ② 隨機添加核苷酸 3. 成熟與篩選 →末端脫氧核糖核酸轉移酶 TdT 催化 →不屬於種系基因的核苷酸添加到VD, DJ之間的連接處,形成N region ③ Repair process: 形成 hairpin loops, Nicked ends 被新的序列修復 *在 B cell 的 light chain, T cell 的 a chain 重組完後篩選 B cell . 被篩選出的 pre-B cell 具有成熟 B cell 的必要功能 T cell . • pre-B cell 完成 light chain 重組→immature B cell (表現 IgM) •B cell 受抗原刺激,在增殖過程中發生 Somatic hypermutation(體基因超突變) pro-T cell:未完成Bchain 重組,爲雙陰性 T cell(CD4, CD8-) pre-T cell:完成阝 chain 重組,才表達 CD4, CD8 ‧ immature T cell:完成ß, a chain 重組,被篩選淘汰強烈辨識自身組織的 T cell 13
ページ12:
Adaptive Immunity T Cell-Mediated Immunity 過程:naive T cell 的 recognition 抗原特異性 clones 增擴張→分化出效應、記憶 T cell→效應細胞功能表現 1.抗原辨識、costimulation ① T cell 辨識 MHC 呈現的 peptides, lipids (NKT 辨識CD1d呈現的脂質、糖脂抗原) ② T cell 上的 Co-receptors (CD4, CD8)與 MHC 結合,協助 TCR 訊號傳遞 ③ APC 上的 Co-stimulators 結合 naive T cell 上的 co-stimulator receptor,促進對病原體的反應 ④ Cytokines 放大Tcell反應,引導不同功能的細胞分化 (1) Co-stimulators T cell APC CD28 B7-1(CD80) CTLA-4 B7-2(CD86) B7-CD28 的結合為必要,若無結合則 Tcell 對抗原呈現無反應 結合傳遞抑制T cell 功能訊號 PD-1 PD-L1, PD-L2 PD ligands 在組織細胞、tumor 上也表現,負調控 T cell (2) T cell receptor and Signal transduction • • TCR 本身為非催化性酪胺酸磷酸化受體,尾端有ITAM,但受體不具有 tyrosine kinase(TK)活性 • Co-receptors CD4, CD8 固定 Lck (TK),一但辨識 MHC 分子,Lac 啟動磷酸化 CD3, (chain 的 ITAM Lck→ZAP70→Calcineurin/NFAT, MAPK, PI-3/MTOR (3) T cell 受刺激後的反應: ① Naive cell 受刺激後分泌IL-2,同時表達表面IL-2 受體 a chain (CD25),成爲 activated T cell →獲得 a chain 的IL-2R 轉為高親和力受體(最初只有 B, y chain) →IL-2 與 IL-2R 使 T cell 大量增殖 ② 分化出記憶細胞 . ·在抗原消失後,組織的 stromal cells 分泌 II-7,IL-15 保持 memory T活性 ·平時不表現效應功能,但不必高濃度抗原或共刺激可喚起 memory T,快速響應 Central memory cell Tissue-resistant memory cell Effector memory cell 存在淋巴器官中 在周邊血、黏膜中 在感染當地快速響應 在皮膚、黏膜中,不進入循環 14
ページ13:
(4) T cell 遷移 * Naive T cell 在血液、次級淋巴器官間遊走 →沒遇到 Ag (S1PR↑) Adaptive Immunity Blood lym. node, spleen →遇到 Ag,停留增殖(CD69↑,S1PR↓)→S1PR↑效應細胞返回血液/移到 B zone 控制 naive/effector T cell 遷移的因素 ①Cell Adhesion Molecules (CAM) Rolling Activation Diapedesis Adhesion 血球滲出 ICAM-3 T cell L-selectin (CD62L) CCR7 LFA-1 (Integrins) CD2 CXCR4 [naive 獨有] HEV GlyCAM-1, CD34 ICAM-1,2 CCL9, Ligands (Siayl-Lewis) (Ig superfamily) CCL21 LFA-1 [APC] CD58 CXCL12 Mucosal MADCAM-1 [HEV, APC] 21 sphingosine-1-phosphate (S1P) *S1P 在周邊血、淋巴管中濃度 >>> LN 周邊血:S1P 結合T cell,誘導 S1P受體(S1PR)內吞→低表達 LN:S1PR 高表達 →T cell 沒遇到抗原:隨著S1P梯度離開淋巴結 →T cell 遇到抗原:S1PR被抑制,T cell 有足夠時間在LN 中分化→ 分化完,S1PR↑,T cell 離開 LN ③ Effector T cell 聚集到發炎部位:已分化的效應細胞遭遇抗原時無需 Co-stimulators 卽可產生反應 • 失去 L-selectin 表達,開始表達Eand P-selectin ligands,與發炎處血管內皮上的 selectin 結合 • 表達 VLA-4,與血管內皮上的VACM-1 結合→更強的趨化力,召集 T cell 15 15
ページ14:
Adaptive Immunity 2.效應 T cell 的發育與功能 (1) Helper T cells' subsets Ti cell TH2 cell |發育 TH17 Cell TGF-B TFH cell IL-6 Treg Cell TGF-B, IL-2 IFN-Y IL-12 IL-4 IL-6, IL-23, IL-1B STAT-1 STAT-4 STAT-6 T-BET GATA3 STAT-3 RORyt STAT-3 STAT-5 Bcl-6 FoxP3 |分泌 IFN-Y IL-4, IL-5, IL-13 |效應 清除胞内病原 「過敏、抵抗寄生蟲 參與第四型過敏反應 |功能 IFN-y 活化 macrophage ,細胞 IL-17, IL-22, IL-21 ① IL-5 活化 eosinophil、| 活化召集 neutrophil, mast cell, ② IL-4,II-13 Alternative 活化 M2 B cell class switch | IL-17 促顆粒球、組織釋放 | chemokines, TNF, IL-1, IL-6, CSF 等,引起發炎反應 ,IL-22 維持上皮屏障功能 IL-21 TGF-B, IL-10 |清除胞外病原 產生抗體 「抑制T cell, | IL-21 刺激 B cell 預防自身免疫 |分化 plasma cell IgG IgE (IL-4, IL-13 促進) IgG2, IgG3 | 分泌的 cytokines 正回饋,促進更多 naive cell | IL-6是決定是否走向 Treg 分化增值 的關鍵 *CD4 T cell 最初表現IL-12R1→受到INF-Y, TGF-B後,分別表達IL-12RB2, IL-23R →接受IL-12,IL-23 刺激分化成TH1, TH17 (2) CD 8 T cell 的刺激、活化 CD8 T cell 受到 MHCI抗原、CD4 T cell (IL-2)、co-stimulators 刺激 分化出效應 Tc, memory Tc 辨識受感染細胞的MHCI 分泌perforin, granzymes, granulysin, FasL, IFN-Y, TNF-B Granzymes B • 活化 caspase 3,引起 caspase proteolytic cascade ·活化 procaspase 8,引發細胞凋亡外在路徑 ,裂解 BID,間接活化 caspase9引起凋亡內在路徑 FasL 與標的細胞表面Fas作用,引發細胞凋亡外在路徑(caspase 8, caspase 10) 16
ページ15:
Adaptive Immunity Humoral Immunity 過程:naive B cell 的 recognition Bcell呈現抗原給 Th,受幫助分化出記憶 B cell, plasma cell 1. 抗原辨識:辨識可溶性抗原、MHC 分子呈現抗原 胸腺依賴型抗原(TdAg) 胸腺非依賴型抗原(TiAg) 蛋白質抗原 T Fu 非蛋白質抗原 microbiot ASK c3b. TCR CD40L polyvalent 多个型 antigen 抗原 TLR HAC CD40 BLK [CD2] CD19 (CR2) Signal1 Signal 2. I FY YOUR X B B cell cell • Step1:BCR 辨識抗原,經由受體介導內吞將抗 原納入細胞 Step2: B cell 呈現抗原給 TH cell -Tcell 受刺激產生 cytokines - Cytokines、B cell 的 CD40 結合 Tcell 上的配體 →刺激 B cell 增殖 • Step3: TH cell 活化B cell,促進Ig 型別轉換 signal1 Signal 2. •Ti-1Ag: G(-)的LPS,刺激成熟/未成熟 B cell (又稱 B cell mitogens 分裂原,引起增殖、分化) →polyclonal activation ·Ti-2Ag:由高度重複分子組成,G(+)的莢膜多糖、 flagella ,活化成熟 B cell,產生 IgM →limited isotype switching *無記憶性 (IgM→ IgG, IgE, IgA) *有記憶性 (1) Signal transduction Iga, Ig (CD79)引起 Tyr磷酸化→誘導syk 訊號級聯→上調轉錄因子 Myc, NFAT, NFKB (2) 活化:in germinal center ① HSC 在 BM 中分化重組(ProB→ Pre B→ immature B) ② Immature B 在周邊淋巴組織繼續成熟(T1 B→ T2 B cell→ mature B) ③ Naive B (mature B)受到抗原活化,呈現給 Th,Th協助B cell 增殖,啟動 germinal center (在GC啟動時發生 class switch) ④ germinal center 極化出 dark, light zone (GC B cell)→ 篩選增值後分化成 Bm, plasma cell Dark zone: 細胞密集 ·Light zone: 細胞疏鬆 BM cel GC Naive Bicell B cell (Plasma cel Dark zone Light zone GC B cell (centroblast)較密集,其中的Bcell 增殖後的 B cell (centrocyte) u 移動到 LZ 有更強的增殖性 發生體細胞超突變 篩選出對抗原有最高親和力的細胞,受到Tfh的 IL-21 刺激,繼續存活、class switch 最終變成 plasma cell 分泌抗體,或變成記憶 B cell 17
ページ16:
Adaptive Immunity 2. B cell 亞型(成熟的B cell 才區分亞型) B-2 cell B-1 cell . Follicular (FO)cell:最常見的B cell, 大量存在於淋巴濾泡中,產生高親和力 的抗體 • 僅佔5% Breg cell 免疫抑制 B cell 無記憶性(不屬於適應性免疫) 分泌IL-10,IL-35,TGF-B • Marginal-zone (MZ)cell: • 不具有類別轉換、體細胞突變功能 可產生高親合力抗體 促進 Treg 生成 主要在在脾臟邊緣區,優先進行 T cell 非依賴性活化,表達大量IgM, TLRs • 在胎兒時期產生,之後在周邊組織進行 self-renew 3. Functional responses (1)中和 表面表達 CD5, mlgM *B1 cells, marginal-zone B cells, MAIT cells, y8T cells, and NK-T cells (2) Opsonization 調理、吞噬 (3) 活化補體 (4)ADCC 4. Immunoglobulin →> 以後天免疫的方式響應發炎反應 且具有先天免疫的特色:快速反應、抗原辨識多樣性有限 (1) Plasma cell分泌的糖蛋白,作爲B cell 表面受體BCRs辨識抗原、體液免疫的效應分子 (2)一個 B cell 僅會產生同一種抗原特異性的 Ig →allelic exclusion 對偶基因剔除,僅表達一種等位基因 (3)結構 Heavy chain:a, y, 8, e, u(chromosome14) Light chain: K (chromosome 2), 入 (chromosome 22) (x,入不出現在同一個輕鏈上) (free x/入=0.26~1.5; lg 結合型k/入=2) – Hypervariable region, HVR (Complementarity-determining region, CDR):特異性結合抗原 *1個V region 有3 個 CDR - Framework-determining region, FDR:作為 CDR 的支架 Variable region:抗原結合位所在區域 Constant region Paratope:抗體互補位,抗原結合位,由輕、重練各6個 CDR 組成 Fab region:抗原結合片段,V+CH1+ light chain Fc region:決定抗體類型 Hinge region: CH1, CH2 間富含 Pro 的結構,IgM, IgE 沒有 hinge region 18
ページ17:
(4)Fc region 決定 Ig 類型 IgA 可藉由 J chain 形成 dimer,有IgA1, 2 亞型 Heavy chain: - IgA dimer 有上皮細胞產生的 Secretory component 連接 a -黏膜免疫,可存在於母乳中 -血清濃度第二高 IgD Naive B cell 的抗原受體 IgM - 藉由 S-S bond, J chain 形成五聚體形式,約900 kDa – Naive B cell 的抗原受體 -參與活化補體 – 無 hinge region,重鏈有4個固定區(CHi~Ch4) 抵禦寄生蟲、介導過敏反應 8 u Adaptive Immunity IgE E – 無 hinge region,重鏈有4個固定區(CH~Ch4) Hinge region: CH1, CH2 間 富含 Pro 的結構 (IgG1>2>3>4) - 回饋抑制 B cell IgG - Subclass1-4,分子量150 kDa 血清濃度最高(85%),半衰期最長 -調理、活化補體 (IgG 活化能力最強,IgG4 不具固定補體能力) – ADCC (抗體依賴性細胞介導細胞毒殺) -可穿過胎盤提供嬰兒保護能力,也可存在母乳中 *血清濃度:IgG>A>M>D>E *半衰期:IgG>M>A>E H Y L L S-S bond NH Fab region Hinge region. CH Fc C :region CHA (5) Fc receptor:皆屬於 Ig superfamily FcyR 與IgG 結合 FcyRI(CD64) 親和力最高,在嗜中性/嗜酸性球、DC表現 結合活化細胞、引起吞噬、毒殺 FcyRIIA/B(CD32) 在嗜中性/嗜酸性球、血小板、B cell、mast cell 表達 FcyRIIIA/B(CD16) Fcar FceR 與IgA 結合(CD89) 與IgE 結合 有 Fcel, FcelI 兩種 FcyRIIB 有ITIM 序列,回饋抑制 B cell CD16a 在 NK cell 表達,引起 ADCC、誘導巨噬細胞釋放 cytokines CD16b 在嗜中性/嗜酸性球、DC 表達 在嗜中性/嗜酸性球、單核球表達,誘導吞噬、毒殺 在 mast cell、嗜鹼性球表達,結合 IgE後釋放顆粒引起發炎 在嗜酸性球表達,使其釋放顆粒毒殺寄生蟲 FceRl:低親和力 FceRII (CD23):高親和力 (6) Somatic hypermutation 體基因超突變(in GC dark zone) ·發生在受抗原刺激後的 B cell • BCR 區域的突變率極高,通常是單鹼基替代突變 . 不改變抗體、抗原結合的能力,但增加親和力 (7) Class switch (H chain isotype switch) (In GC light zone) 發生在固定區,可辨識的抗原不受改變 • (IgM→IgG, IgA, IgE) ・TdAg 引起,T cell 的 CD40L 結合 B cell 活化產生 IL- IL-5 4, TFN-Y, TGF-β等促進 class switch • TiAg type2 引起部分 class switch (IgM→IgG) Th1 IFA-11 0 Treg TGF-B 0 IgM IgG IgG2a IgG2b | Ighs | 29A | IgE Th2 IL-4 0 ④ Ⓒ ① ④ 强烈 化 ① 日 ①④ 0 ④ (8) Abzyme:具有酵素功能的抗體,immunotoxin:抗體+毒素 19
ページ18:
Laboratory Techniques in Clinical Serology & Immunology Laboratory Techniques in Clinical Serology & Immunology Unlabeled immunoassay 1. Precipitation:溶解性抗原與溶解性抗體的相互作用 (1) Immunodiffusion 可定性、定量抗原抗體 單向輻射免疫擴散 製備含有抗體的 agar plate (SRID, Mancini technique) • 待測物濃度∝(擴散直徑)2 Antibody inped in 雙向免疫擴散 (Ouchterlony technique) (2)免疫電泳 Antibody Antigen AA aaA a₁a A,Az AB Preg Y Z Agar matrix Precipitate Pattern of Identity Pattern of Partial Identity Pattern of Non Identity Immunoelectrophoresis pH 8.3-8.7 monoclonal gammopathy (IEP) 1. Ag用電泳分離 © ④ ④ 00。 Counter immunoelectrophoresis Agarose (3) Nephelometry Electric current Wells containing antigen and antibody Precipitin line 0 →2.加入Ab e . • Immunofixation electrophoresis (IFE) ·血清蛋白電泳+免疫沉澱法 (western blot) monoclonal gammopathy Rocket immunoelectrophoresis (Laurell technique) AGAR GEL POURED ANTIBODY INCORPORATED IN THE AGAR Height of precipitation line Slide ON GLASS ° 21 SLIDE INCREASING ANTIGEN CONCENTRATION
ページ19:
Adaptive Immunity 2. Agglutination 兩階段反應 第一階段 Sensitization ·抗原抗體可逆結合 -肉眼不可見 第二階段 Lattice formation 形成晶格 -可見的反應 - Sensitized particles 之間形成 cross-links (1) Direct agglutination:已知抗原測未知抗體 (2)Indirect (passive) agglutination: carrier 包覆已知抗原測未知抗體 (3)Reverse passive agglutination: carrier 包覆已知抗體測未知抗原 (4) Agglutination inhibition:兩種抗原競爭有限的抗體結合位 (5)Coagglutination Hemagglutination (HA) Hemagglutination inhibition (HI) (6)Complement fixation 血清中有抗體:與抗原、補體結合,RBC 沉澱 補體+抗原+待測血清 加入 RBC, Ab 血清中沒有抗體:加入的抗體與RBC、補體、抗原結合 溶血 Labeled immunoassay • 競爭/非競爭性 異質/均值 1. Enzyme immunoassay EIA 競爭性、非競爭性、sandwich · ELISA 常用的 enzyme,受質: Enzyme HRP (Horseradish peroxidase) : yellow (辣根過氧化酶) Alkaline phosphatase (ALP) 2. Radioimmunoassay RIA 受質 3,3',5,5'-Tetramethylbenzidine (TMB):藍色 ABTS:綠色 BCIP /NB, PNPP *最常使用 1251 標記(容易標記蛋白質,散發y 射線) 3. Chemiluminescence immunoassay CLA . ·利用氧化還原反應發光 化學冷光標記:luminol, acridinium esters, peroxyoxalates, dioxetanes, Tris ruthenium (II) * Acridinium esters 在強鹼與H2O2中,ester bond 被破壞形成不穩定物質,發出430nm 冷光 4. Fluorescent immunoassay FIA 螢光探針:R-phycoerythrin, Fluorescein, PerCP, Texas red, Rhodamine (540/573) *最常使用 Fluorescein isothiocyanate (FITC),激發光490nm、發射光 517nm Direct FIA (DFA) Indirect FIA (DIA) 螢光標記在Ab上,直接偵測抗原 螢光標記在抗人類球蛋白上(二抗),偵測血清抗體 22 22
ページ20:
Laboratory Techniques in Clinical Serology & Immunology Immune function tests *分離 mononuclear cells, granulocyte:密度梯度離心,利用1.077g/ml 的 Ficoll-Hypaque solution 1. ELISPOT test Step.1 T cell Cytokine-specific Ab Step.2 Cytokine-specific Ab Step.3 酵素標記的二抗結合成色 2. Phagocyte function assay cytokines 3. Proliferation assay: Ag + cells H-thymidine 4. Cytotoxic T lymphocyte (CTL) assay 補體試驗 . 補體去活化:56℃,30分鐘 補體固定:測量特異性抗體、抗原 抗原抗體複合物固定補體,使 RBC 不溶血 plasma Lymphocytes, monocytes, platelets Ficoll-Paque PLUS granulocytes, erythrocytes • Complement hemolysis 50% anti-sheep RBC + sheep RBC + serum→→50%SRBC 23
ページ21:
Acute-Phase Reaction 1.抗體種類 Vaccine Allotypic antibody 不同個體中同一類抗體 的差異 Idiotypic antibody 異種抗體:同一個體中不同B cell clone 產生的不同抗體 Isotypic antibody Humanized antibody 同種抗體:所有個體的抗 體共有的抗原特異性結構 2.佐劑:本身不具抗原性,與疫苗一起注射可增強免疫反應 人類疫苗佐劑:aluminum potassium sulfate 動物實驗用佐劑 Freund's incomplete adjuvant 弗氏不完全佐劑 Freund's complete adjuvant 弗氏完全佐劑 抗原+礦物油→乳化 在完全佐劑中加入死的/乾燥的分枝桿菌 3. 疫苗種類 活性減毒疫苗 失活疫苗 *通常一劑卽具保護性,保護效期較長,可活化細胞、體液免疫 *有可能突變成野生型病毒 *疫苗通常需冷藏 -流感疫苗(鼻噴) - Poliovirus Vaccine 小兒麻痹沙賓(口服):最先誘導 IgA - MMR - 腺病毒 type4,7 (口服)、水痘、VZV、天花、輪狀病毒(Rotarix) – BCG 卡介苗 -炭疽病疫苗、登革熱四價疫苗、Ebola Zaire vaccine *相對減毒疫苗較安全,但須注射追加劑,僅活化體液免疫 -流感疫苗(注射) —— Poliovirus Vaccine 小兒麻痹沙克 -日本腦炎 -A肝疫苗 次單位疫苗 病毒載體 -百日咳疫苗、狂犬病疫苗 -類毒素疫苗:白猴、破傷風疫苗 - Viral-like particle:HPV疫苗(capsid protein L1) - 純化/重組蛋白:A,B型肝炎疫苗、輪狀病毒 RotaTeq (口服) - 多醣體:type B haemophilus, N. meningitidis, 肺炎鏈球菌疫苗, typhoid vaccine *以T-independent 活化 B cell SARS-CoV2 AZ 疫苗 mRNA 疫苗 *可誘發細胞、體液免疫 SARS-CoV2 BNT, Moderna疫苗 24 24
ページ22:
Acute-phase reaction Acute-phase reaction Acute-phase reaction. 1.屬於先天免疫反應 2.肝臟在 12-24hr.內響應訊號多肽, cytokines (IL-1,IL-6,TNF-a)刺激產生急性期蛋白 APPs 3. 臨床功能: ① 與許多疾病狀態相關→局部發炎、組織損傷的指標 ② 臨床應用:監測疾病發展與併發症、評估免疫疾病的治療、手術後評估 Characteristic 1.血清糖蛋白的主要組成 2.多爲 a1 與a2-globulin Positive APPs ① 升高約50%:a2-Macroglobulin, C3, Ceruloplasmin ②升高約 2-4 倍:a1-Acid glycoprotein, a1-Antitrypsin(蛋白酶抑制劑), a1-Antichymotrypsin, Fibrinogen, Haptoglobin ③ 升高近百倍:CRP Negative APPs Albumin, Transferrin, Transthyretin 3. APR 期間的 plasma level ① 急性事件後4-6hr.:CRP, a1-Antichymotrypsin 首先升高 ② 12-24 hr:a1-acid glycoprotein (orosomucoid)→ a1-antitrypsin, haptoglobin, C4, fibrinogen, serum amyloid ③ 2-5 天中:C3, ceruloplasmin 升高至最大値 合成與代謝 1. APPs 快速合成回應組織損傷,其增加具有不同的動力學與程度 2. 不同 APPs 的變化和最大濃度因臨床情況而異,也被其他非發炎反應影響 (e.g. 溶血時 haptoglobin↓,缺鐵時 transferrin↑) 3. 不一定同步改變:濃度受到分解代謝、合成率影響 4. 半衰期:多數APPs半衰期為2-4天,CRP則為5-7hr. 康復時CRP比其他APPs下降更快 5. APPs 下降:肝功能不全、腎臟 leakage、腸道病變 臨床意義 1. 不能用於診斷疾病,但可用於監測進展或治療 2. Laboratory analysis (1)定性:乳膠凝集 LAT (2)半定量:電泳 (3)定量:免疫化學、標記免疫分析 (4)Detection, Identification:放射免疫擴散、免疫電泳 25
ページ23:
Acute-Phase Reaction C-reactive protein (CRP) 1. 命名:最初發現與 streptococcus 的 C polysaccharide 反應 2. CRP 鈣依賴性結合細菌表面的磷酸膽鹼→作爲opsonin,活化補體 3. 正常情況下 CRP 在血漿中濃度極低,APR時可升高1000倍,為急性發炎最敏感的指標 4. 屬於 pentraxin (PTX) family (1)爲結構同源的五聚體蛋白 (2)辨識微生物結構、參與先天免疫 (3)主要成員 ·Liver production: CRP, serum amyloid P(SAP,結合凋亡細胞的 phosphatidylethanolamine) ・PTX3:由 DCs, Mo, 內皮細胞等響應 TLR ligands, cytokines (TNF 等)產生,可辨識多種細菌、病毒、眞 菌分子、凋亡細胞 (4)功能:結合 C1q,活化補體 classical pathway 5. Characteristic (1)生物特性 . 無法穿過胎盤 正常約0.08~0.4 mg/dl→ 急性期可增加到數百 mg/ml(三天內增加100-1000 倍) . 敏感性高 急性期直接定量測量 • 可區分細菌/病毒感染:細菌感染時 CRP ↑ ↑ ↑ . 作為發炎反應的參數 (2)物化特性 . 分子量約 12000 D . 電泳出現在 B-y interface area 成分 100%爲 peptide,5個 subunits 非共價結合形成環狀五聚體(其氨基酸成分與IgG 相似) 對熱不穩定,70℃加熱30分鐘可破壞 6. Function (1)活化補體 與 C1 結合組成 complex (類似Ag-Ab 複合物)開啟補體 cascade →增強調理作用,在IgM, IgG 產生前清除微生物 CPR complex 結合 NK cell, monocytes,可能可以誘導細胞的抗腫瘤活性 (2)結合 C-polysaccharide, C-polysaccharide:鈣依賴性結合,每個 CRP subunits 需要 2 個鈣離子 (3)結合 T cell 抑制其部分功能 (4)抑制血小板凝集(藉由凝集 y-globulin 與 thrombin) *CRP 的Ig 特性:凝集、沉澱、調理、活化補體、Capsular swelling (但 CRP 不具抗原性,結合不具特異性) 7. 臨床意義 發炎反應、malignant organic diseases 的檢測 ●監測免疫疾病治療,e.g. rheumatoid arthritis (RA) ・評估手術後狀況:正常情況下CRP在手術後2天達高峰,在7-10天後恢復正常 提早預測對特殊藥物的反應 • 在微生物檢測困難的情況下檢測感染 →例:新生兒敗血症或腦膜炎、免疫抑制患者感染、燒燙傷併發感染、手術後感染 *因為缺乏特異性,不能作為診斷依據,且在慢性發炎疾病中不可靠指標 26
ページ24:
8. 實驗室檢測 • Precipitation method:使用補體或 anti-CRP 進行沉澱反應 補體固定試驗(較少做) ·免疫學檢查(較常使用):Nephelometry 免疫比濁法、EIA、乳膠凝集試驗 9. High-sensitivity C-reactive protein (hs-CRP) 用於評估、檢測心血管疾病、心臟病、中風風險 →間隔兩週採集兩次檢體,取平均值 < 1.0 mg/L Low risk 1.0~3.0 mg/L >3.0 mg/L Intermediate risk High risk -應找出明顯感染、發炎,評估排除心血管原因 >10 mg/L −2週後再度檢驗 Acute-phase reaction 27 27
ページ25:
Serology of Viral Infection Serology of Viral Infection Epstein-Barr Virus (EBV) 1. Characteristic - Herpes virus, dsDNA, capsid, envelop 感染口咽部上皮細胞(EBV receptor, CD21)、B細胞 -引起傳染性單核球增多症(IM)、Burkitt's lymphoma、鼻咽癌 2. Laboratory diagnosis *抗原出現順序: EBNA(核抗原), EMA(膜抗原)→EA-R,-D(早期抗原)→VCA(病毒 capsid抗原), LMA(晚期膜抗原) ①特異性抗體檢測 <4歲兒童必須測定(因為有70-80%嗜異性抗體爲陰性) 急性期 恢復期 Anti VCA IgM:初次感染的急性期指標 ·Anti VCA IgG:感染後2-4周效價最高,隨後下降持續終身 →Burkitt's lymphoma, NPC患者抗體效價高 ·Anti VCA IgA →NPC患者的預後指標 Anti EA-DIgG:有10-20%病人無法測出,感染後3個月消失 Anti EA-RIgG:有時在兒童急性期、恢復末期出現 *皆無法作為急性期指標 EBNA IgG:感染後2-4個月才出現,以高效價持續終身 →會經感染的指標 →re-activation 時升高 ② Heterophile antibody (HA) test 嗜異性抗體檢測 . • Paul-Bunnell antibody 在IM 急性感染期出現 被綿羊、馬、牛RBC吸附,不被天竺鼠腎臟抗原吸附 Paul-Bunnell test Davidsohn-differetial test 用ELISA, IFA 檢測 ·Anti VCA : P3HR-1 細胞株 ●Anti EA:病毒細胞株須經 處理以表現EA 抗原 • 抗補體間接螢光免疫法 Raji 細胞株 將待測血清與 horse/sheep blood 混合觀察,凝集爲陽性 Tube method,在 Paul-Bunnell test 陽性且抗體效價在1:56↑時進行 Monospot test 傳染性單核球增多症 檢測 HA • 第一階段:吸附(血清分別加入天竺鼠、牛血) 第二階段:加入綿羊 RBC 觀察凝集反應 HA 陽性: - HA 不被天竺鼠 RBC 吸附→凝集 -HA 被牛血吸附, 不凝集 Slide method,用馬 RBC 取代綿羊 RBC . 第一階段:與 Davidsohn-differetial test 相同 • 第二階段:凝集用馬血取代 Burkitt's lymphoma 鼻咽癌 好發於兒童 Anti-VCA↑↑ 28 ・Anti-VCAIgA↑ ↑ • Anti-EA-D ↑ →與腫瘤體積相關,能作為預後指標
ページ26:
Hepatitis virus 1. HAV Serology of Viral Infection - ss (+) RNA Characteristic -急性感染、大多可康復 -潜伏期長(平均28天)、傳染迅速,糞口傳染 -症狀:Flu-like, Jaundice 2. HBV (1) Characteristic - Enveloped DNA virus, circular dsDNA - 潛伏期長(45-160D) Diagnosis ① AST, ALT 上升20-50倍,且 ALT/AST ratio>1 ② 血清學檢測:ELISA, RIA,補體免疫試驗 · Anti-HAVIgM:最近感染 ·Anti-HAVIgG:會經感染 −在肝臟緩慢複製引起 cytopathic effect→ Cell-mediated immunity 清除受感染細胞 -有/無、急/慢性症狀取決於受感染者自身免疫情況 (2) Diagnosis Antigens Antibodies 急性期 • HBsAg:感染指標 . Anti-HBc IgM:急性期感染 HBeAg, HBV-DNA:病毒複製活躍指標 →治療監測 • Anti-HBe:病毒不再複製,但HbsAg 仍存在 恢復期 慢性感染 抗原出現順序:S→E→ C 抗體出現順序:C→E→S Jaundice) | Symptoms | Virus) shedding, HBsAg [ HBeAg | 【HBsAg] Anti-HBs window Anti-HBC Months after exposure And-HBe Liver enzymes ・Anti-HBe:恢復期的第一個指標(急性期上升,恢復期持續,其他 Ab 還未出現) • Anti-HBs:疫苗接種、感染康復→具保護性 • Anti-HBc IgG:會經感染、慢性感染 HBsAg ●疫苗:剪出 HbsAg 的S gene | Symptoms HBsAg HBeAg Anti-HBc, Anti-HBe Anti-HBC Anti-HBe Virus shedding Liver enzymes 123456 Months 123456 789 Years B Time after exposure • Hepatitis B immunoglobulin:接觸病毒後48小時內施打有效 ‧Laminvudine:胞嘧啶類似物,抑制HBV 聚合酶 •Interferon-a:治療慢性感染 29
ページ27:
Serology of Viral Infection 3. HCV (1) Characteristic – Enveloped, ss (+) RNA -病毒複製週期短,多數無症狀 早期篩查治療有利於阻斷傳播 -潛伏期約14-180天 – Cell-mediated immunity 導致肝臟損傷 – Anti-HCV 不具永久保護力 (2) Diagnosis ① 早期檢測 ALT 效果不佳(曲線不斷起伏) ② Anti-HCV(不具保護力,急慢性皆出現) ELISA, EIA 抗體出現順序:Anti-C33C(NS3), C22-3(核殼)→anti-NS5→anti-C100-3(NS4) RIBA *僅有 Anti-C22-3效價不下降,所有抗體皆不具保護力 (recombinants immunoblot assay) 含有4種病毒重組蛋白 strip - 超過2個 positive bands →positive – 1個 positive bands →indeterminate,1個月後再做一次 ③ RT-PCR 檢測 HCVRNA:感染後1-2週出現,慢性感染會一直存在 - 證實 HCV 感染(確認試驗) -可知治療效果 *治療:Interferon-a alone/with ribavirin, thymosin 4. Other hepatitis virus HDV 借助 HBV 的 envelop爲外殼,核心爲 delta 抗原 HEV . Coinfection:anti-HBc IgM(+), anti-HDV IgG Superinfection 二重感染:慢性 HBV 患者感染 HDV,anti-HDV IgM(+) 與 HAV 類似,有10%導致猛爆性肝炎。PCR, ELISA HGV 與HCV 相似,依靠 PCR 檢驗 Human immunodeficiency virus (HIV) 1. Characteristic - - ss (+) RNA – AIDS 主要由 HIV-1(Group M)引起, HIV-2 比例較少 2. Structure gene gag protein . Matrix protein p17 . pol 產生聚合酶、enzyme Capsule protein p24 結合 RNA 的蛋白 p7, p9 30 env Envelope protein: gp120, gp41
ページ28:
3. Pathology (1)HIV 攻擊 CD4+ cell: CD4+T cell, Th, DC, M, monocytes (少部分 HIV 感染 CD4-cell) (2)依據貼附細胞趨向性分類 T-tropic (X4) strains • 利用 CXCR4 爲 co-receprtor 較喜歡感染 Th cells(Th cells 上皆有 CXCR4) ●多爲感染後期發展出 AIDS 後才出現 • CD4/CXCR4 相互作用使細胞融合形成多核巨細胞 Serology of Viral Infection |M-tropic (R5) strains Dual tropic (R5X4) strains • 利用 CCR5 爲 co-receprtor ●較喜歡感染巨噬細胞、樹突細胞(細胞表面含有 CCR5) ●多為感染的早期階段病毒 ●無合胞體誘導 NSI,不發生細胞融合 對三種細胞親和力相當 (3)感染進程 Viremic stage 病毒血症時期 空窗期 -感染後數週,似感冒症狀 -可偵測到病毒顆粒、RNA→Culture, PCR, p24 Ag -感染後6~12週 -Ag降低至幾乎消失僅剩p24 Ag,抗體尙未出現 -感染後2週~6個月 Seroconversion -抗體出現,Ag無法測出 -約10年,CD4+T cell↓↓ Latent phase -Virus RNA(+),淋巴器官中 anti-HIV 高 伺機性感染, – CD4+T cell 數量極低,全身免疫系統嚴重受損 HIV病毒量↑,anti-HIV↓ tumor *CD4+ T cell >500/ul 常無症狀,用良好的生活習慣、醫療保健維持 200-500/ul 感染帶狀皰疹、鵝口瘡、肺部感染、TB風險增加 50-200/ul 伺機性感染(PCP, MAC, CMV)風險增加,進行預防性治療 4. Diagnosis (1)抗體檢測 *檢體來源:urine, oral ① 篩選分析 Indirect Double antigen sandwich EIA Ab capture ELISA Indicator Labeled Protein A HIV Antigen Patient Sample Patient Indicator Labeled HIV Antigen M mple Bead Coated with HIV Antigens | ② 確認分析:screen test(+)時使用 WB 確認 IgG 對 HIV Ab 有專一性 確認 HIV-1 陽性: • CDC:gp120/160、gp41、p24中出現其中兩種條帶 •WHO:gp120、gp160、gp41 中出現其中兩種條帶 Rp160 IgG IgG Rp120 IgG p66 p55 p51 gp41 *HIV-1 的WB 條帶 p31 p24 gag:p55, p24, p17 p17 • pol:p66, p51, p31 p15 • env:gp120、gp160、gp41 31
ページ29:
Serology of Viral Infection (2) P24 antigen (病毒量檢測) 測定先天性感染(母親的HIVAb僅短暫存在)、突發性感染 • 用於預測疾病進展、藥物治療監測→核酸擴增更敏感 *疫苗 -重組蛋白疫苗:gp120 重組蛋白引起體液免疫 -活性減毒疫苗:風險高,引起細胞、體液免疫 - DNA 疫苗:使用 plasmid,活化特定B, Tcell,保護力不確定 32 32
ページ30:
Syphilis Serology of Bacterial Infection 1. Nontreponemal test: 非特異性篩檢螺旋體感染 VDRL PRP card test Regain (serum) + cardiolipin Ag → Flocculation 定性結果:反應性 reactive/非反應性 non-reactive 一般檢測 CSF (發病後4-8週出現) 適用於第二期梅毒檢驗 使用顯微鏡觀察判定 2. Treponemal test: 梅毒螺旋體確認性試驗 FTA-ABS 螢光螺旋體抗體吸附染色 Killed 梅毒粒子+serum+ 螢光標記抗體 33 Cancer Immunology 較常檢測 serum (發病後2-3週出現) 使用肉眼觀察判定(添加 charcoal 活性碳) TP-PA 梅毒粒子凝集試驗 Serum + sensitized particle → agglutination
ページ31:
Cancer immunology Cancer Immunology Cancer-associated gene 1.誘導細胞增殖 Growth factors Growth factors 受體 fms sis Platelet-derived growth factor (PDGF) Colony-stimulating facor1 (CSF-1)受體 erbB 表皮生長因子受體 EGFR neu EGFR 相關蛋白 HER2 erbA 甲狀腺素受體 信號傳遞 src, abl Ha-ras, N-ras, K-ras 轉錄因子 Tyrosine kinase GTP-binding protein with GTPase activity 轉錄因子 AP1 組成 jun, fos myc DNA-binding protein 2. Tumor suppressor、抑制細胞增殖 Rb 抑制 Retinoblastoma 視網膜母細胞瘤 p53 | 產生 nuclear phosphoprotein 抑制小細胞肺癌、大腸癌 DCC 抑制 colon carcinoma APC | 抑制 adenomatous polyposis NF1 抑制 neurofibromatosis 神經纖維瘤 WT1 抑制 Wilm's tumor 3. 調節細胞死亡 bcl2 | 抑制細胞凋亡 Tumor antigens 1. Tumor-specific transplantation Ag (TSTA, TSA) . • · Tumor cell 特有,致癌突變產生的新抗原 由 MHC class I 呈現 e.g. alphafetoprotein AFP 2. Tumor-associated transplantation Ag (TATA, TAA) ·在正常細胞上也表達,腫瘤細胞大量表達 . 病毒誘導的可能性高 e.g. Melanoma相關基因:MAGE, BAGE, GAGE 3. Oncofetal Ag . 在正常 fetal cell 中表達 . 在成人細胞中表達會誘導免疫反應,可能導致癌症 • e.g. 90%的大腸直腸癌有癌胚抗原 carcinoembryonic Ag 34
ページ32:
Cancer Immunology Immune response against tumors 1. Macrophages · Activated Mo are tumoricidal • 機制 ①引起 cytotoxicity, Ab-dependent cell-mediated cytotoxicity (ADCC) * FeyRI (CD64)對抗體具有高親和力 ② 活性氧中間產物 O,H2O2 ③ IFN-Y, TNF 誘導NO產生,抑制DNA合成 ④ Tumor necrosis factor (TNF), lysozyme ⑤ 抗原呈現 2. NK cells · 響應 tumor cell的MHC −MHCI受體作爲 NK cell 的 inhibitory receptors,只要自身MHCI存在,即使有 activator 也不活化 -若不表達 MHCI 或表達 foreign MHC,則 activation receptor 結合活化NK,響應免疫反應 •受到 IL-2 活化 • 機制 ① Cytotoxicity, ADCC, Iyse ② 表達 FasL (CD95L)誘導凋亡、分泌 granzyme B, perforin 誘導 necrosis 或凋亡 ③ 表達 TNF-related apoptosis-inducing ligand (TRAIL) ④ 分泌 TNFa 3. Cytotoxic T lymphocytes (CTL) • 受到 MHC I 呈現的TSTA活化,無論是自身MHC 或 foreign MHC 呈現皆受到毒殺 機制 ① Cytotoxicity *Tumor 不表達 B7 (CD80)來逃避 T cell 活化 - 施打 PD1 inhibitor: 阻止 T cell activity 下調 – 施打 PDL1 inhibitor:阻止與PD1 結合下調 Tcell △PD-1, PDL-1 結合下調 T cell 活性 ② 表達 FasL (CD95L)誘導凋亡、分泌 granzyme B, perforin 誘導 necrosis 或凋亡 ③ CTI, NK cell 釋放 perforins 穿孔素、granzymes 顆粒酶 4. Th cells B cell, macrophage 呈現 TSTA 給 Th,誘導 cytokines 產生,反向活化 Mo→ kill tumor cells 5. B cells 產生抗體,誘發NK cell, macrophage,顆粒球產生 ADCC Tumors escape immune recognition 1. 減少 MHCI表達 2.表達 FasL 增加,殺死 Fast Tcells,逃脫免疫監控 3. 不表達 B7(CD80/CD86) Cancer Immunotherapy 1. 調控 costimulatory signals 2. 增強抗原呈現細胞表達 3. Cytokine therapy、單株抗體 △若表達 Fas 增加,則與 CTL 上的 FasL 作用而凋亡 4.腫瘤疫苗:BCG 用於抑制膀胱癌、棒狀桿菌用於治療黑色素瘤 35
ページ33:
Immunodeficiency Immunodeficiency ·50%:Bicell 缺陷 ·40%:T cell缺陷 ・6%:Phagocytes 缺陷 ·4%:補體缺陷 Combined both B and T cells deficiency 1. Severe Combined Immunodeficiency (SCID) (1)表現: • ·循環 lymphocytes 數量少、未增值的T cell、胸腺不發育 早年致命:先出現病毒、真菌感染,較晚出現細菌感染(剛出生時有來自胎盤的抗體) (2)基因缺陷 影響訊息傳遞 IL-2 receptory chain 缺陷、JAK-3 (X-linked SCID) ZAP-70 影響 IL-2,-4,-7,-9-15訊息傳遞,導致缺乏T,NK cell · Zeta-chain-associated protein kinase 70 傳遞 TCR 訊號 • 缺陷導致無CD 8+ T cell 表現的CD4+Tcell可能數量正常,但功能異常 影響 T, B cell 代謝 ADA · adenosine deaminase 腺嘌呤去胺酶:催化 adenosine 轉化成肌核苷(inosine) PNP . • 導致 adenosine 堆積,影響嘌呤代謝、DNA合成 ·T, B,NK cell皆有缺陷 purine nucleoside phophorylase 嘌呤核苷酸磷酸化酶 • 缺乏與ADA缺乏相似 影響 T, B cell 重組 RAG-1,2 • recombinase activating genes • T, B cell 無法基因重組→缺乏有功能的 T, B cell Artemis 基因編碼 DNA 修復、重組的酵素 其他 • Protein tyrosine phosphatase, common leukocyte antigen PTP (CD45) . 缺陷導致缺乏aßT cell • 不影響 yat cell, B cell 增加 TAP • Transporter associated with antigen processing · TAP 突變導致缺乏MHCI 2. Wiskott-Aldrich Syndrom (WAS) (1)X-linked disorder (X染色體短臂, Xp11 缺陷) (2)表現 • 出生時 B, T cell 數量正常,但隨年齡減少 . X-linked microthrombocytopenia · Lower IgM; IgA, IgE ↑ 導致嚴重感染、淋巴惡性腫瘤、濕疹 (3)與 sialophorin (CD43,細胞骨架相關醣蛋白)有關 36
ページ34:
Immunodeficiency 3. Bare-lymphocyte syndrome →MHC II 基因無法轉錄,lymphocytes 無法參與 Th cell 交互作用 4. Interferon-Gamma-Receptor Defect →缺乏IFN-y receptors,容易感染分枝桿菌 T cell deficiency: DiGeorge Syndrome 迪喬治症候群 *先天性胸腺、副甲狀腺發育不全:影響 Tcell發育,間接影響 B cell (1)症狀 . ·心臟病(法洛四聯症)、顏面異常、唇顎裂、副甲狀腺功能低下(低血鈣) 長期病毒、真菌感染、慢性腹瀉 (2)染色體22q11 缺陷 * Nezelof syndrome:也是先天性胸腺異常,但無心臟、副甲狀腺異常 Antibody deficiency 1. X-linked Agammaglobulinemia (X-LA) ・X連鎖的 Btk gene 缺陷 缺乏 Bruton's tyrosine kinase 影響 BCR 訊號傳遞→pre-B cell 無法基因重組 缺乏功能性 B cell, immunoglobulin (IgG) 症狀約在出生後9個月出現(來自母體的抗體耗盡),出現重複細菌感染 可給予免疫球蛋白緩解,但很少活過青春期 2. X-linked Hyper-IgM Syndrome (XHM) ·T cell surface marker CD40L 缺陷→影響受 Th 協助的B cell 型別轉換, • 缺乏 IgG, IgE, IgA,但IgM↑(10mg/ml,正常約1.5 mg/ml) 3. Common Variable Immunodeficiency (CVI) ・B cell 無法發育成 plasma cell→hypogammaglobulinemia (late-onset 晚發性) · Plasma cell 數量極少,各類免疫球蛋白含量低 4. Selective deficiencies of Immunoglobulin Classes ①IgA 缺乏:最常見,引起重複呼吸道、泌尿道感染 ② IgG缺乏:較罕見 . • IgG2 缺乏:常引起肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌感染 IgG4 缺乏:引起過敏 5. Hyper-IgE Syndrome (job syndrome) . 體染色體顯性遺傳,gene位於第4對染色體上 . · IgE, eosinophils ↑ • 症狀:皮膚膿瘍、濕疹、肺炎、面部異常 37
ページ35:
Immunodeficiency Phagocyte disorders 1. Chronic granulomatous disease (CGD) (1)Phagocyte NADPH oxidase (PHOX)缺陷 →難以形成活性氧化合物(超氧自由基)、無法殺死病原體 →Cytb558 gp91 亞基缺陷:Xlinked,佔70% (2)症狀 過度發炎引起牙齦炎 • 02 Cytochrome b558 H+ NADPH gp91 p22 Rap 1A Rac p67 02" 1/2 p47 p40 NADP+ 毒殺功能減弱導致淋巴腫大、肉芽腫、慢性化膿性感染 體染色體隱性 APC 能力也減弱 易受細菌、真菌感染(但不容易受到可產生過氧化氫的細菌感染) (3)硝基藍四氮唑 NBT test:顯示吞噬細胞功能降低 (4)治療:IFN-Y • 體染色體隱性遺傳 2. Chediak-Higashi Syndrome ▶陽性黃色,陰性藍色 ・LYST (lysosomal trafficking regulator)基因(CHS1 gene)缺陷→物質無法正常運輸到 lysosome 中 →Lysosome 儲存、分泌功能受損 • Albinism 白化症:缺乏色素沉著 3. Leukocyte Adhesion Deficiency (LAD) (1)Integrin B2 (CD18)缺陷:包含LFA-1,mac-1, Gp150/95 (2)症狀 • 容易被細菌、真菌感染 影響發炎部位細胞聚集能力 影響 B, T cell 間互動,對病毒免疫力稍減 4. Reduction in neutrophil count (1)顆粒性白血球減少症、嚴重導致無顆粒性白血球症 (2) G-CSF 減少 . • ·先天性:易受細菌感染 後天性:某些藥物、放射線引起,e.g. Autoimmune disorder (SLE 等) 38
ページ36:
Tolerance Tolerance and Autoimmunity Tolerance and Autoimmunity Central tolerance 在 B, T cell 成熟前刪除有自身抗原高親和力受體的 clones ① T cell:在胸腺中進行正向、負向選擇 Peripheral tolerance 在次級淋巴器官殺死成熟淋巴球 識別 tolerogenic Ag 的淋巴球 apoptosis or anergy 無反應性(不增殖) ・正向選擇:MHC-restriction,與MHC有反應的 T cells: T cells 被留下 ・負向選擇:與MHC低反應性的T cells 被留下 ② B cell:在骨髓、fatel 肝臟中基因重組,刪除 autoreactive B cell Autoimmune diseases 1.原因 ① 隔離抗原 sequestered antigens 釋放 . .與自體抗原高親和力: apoptosis .與自體抗原中度親和力:上調 Foxp3,引發 Treg 抑制與自體抗原的反應 →來自免疫特權部位(腦、眼睛、睪丸、子宮等)的抗原因外傷、感染等被釋放進入血液,被免疫系統識 別攻擊 ② MHC calss II 不當表現 ③ Molecular mimicry 分子相似性引發抗體交叉反應 外來抗原與組織有相似的抗原決定基 引發抗體交叉反應 外來抗原 Human CMV IE2 K. pneumoniae 固氮酶 Poliovirus VP2(脊髓灰質炎病毒) Papilloma virus E2 自身分子 HLA-DR HLA-B27 Ach receptor 乙醯膽鹼受體 Insulin receptor Insulin receptor 狂犬病毒醣蛋白 Streptococcus group A 心臟瓣膜、腎臟基底膜 HIV p24 2. Diseases (1)器官特異性自體免疫疾病 ① 甲狀線相關 IgG 穩定區 Hashimoto's Thyroiditis 橋本氏甲狀腺炎 ·干擾碘吸收、甲狀腺腫、最後甲狀腺功能減退 自體抗體: – anti-TPO (anti-microsome)(過氧化酶) -anti-Tg(甲狀腺球蛋白) •T3, T4 low,甲狀腺有 lymphocytes 浸潤 ② Myasthenia gravis 重症肌無力 ・自體抗體(anti-Ach receptor)作為 agonists 促進劑 · 自體抗體與 Ach receptor(乙醯膽鹼受體)結合 ·與HLA-B8, HLA-DR3 相關 . Grave's Disease 格雷夫氏症 自體抗體 long-acting thyroid-stimulating, LATS 作爲 agonists 促進劑 · TSH receptor 與LATS (anti-TSHR)結合 →TSH 不斷釋放造成甲亢 39
ページ37:
Tolerance and Autoimmunity ③ Goodpasture's syndrome 古巴斯徹氏症 抗體 anti-glomerular basement membrane (GBM, IgG)與肺泡、腎絲球的基底膜結合活化補體反應 →造成腎臟、肺臟損傷 ・Ab 攻擊腎、肺臟 type II hypersensitive reaction 相關 HLA 分型:HLA-DR2 ④ Insulin-Dependent Diabetes Mellitus (IDDM) 約佔糖尿病的10% 抗體(ICA, IAA, GAD)結合胰島β cell –引起 cytotoxicity T cell 攻擊 - 引起抗體介導補體溶解 引起 ADCC ⑤ Polymyositis 多發性肌炎: anti-Jo1 ⑥ Sjögren's syndrome (SJD)修格蘭氏症候群/乾燥症 ·外分泌腺體失常疾病,常繼發於 RA 出現口乾、眼乾,CD4 Tcell, B cell, plasma cell 浸潤腺體→導致腺體功能障礙 與 anti-SSB/La, anti-SSA/Ro, rheumatoid factor, HLA-B8 有關 ⑦ Anemias •惡性貧血:anti-IF 結合內在因子、anti-parietal cell,干擾 B12 吸收 •溶血性貧血:抗體結合 RBC 引起溶血,Coomb's test(+) . Drug-induced anemia ⑧ Ankylosing spondylitis (AS) 僵直性脊椎炎 ・下背部疼痛、僵硬,脊柱活動性喪失,好發於年輕男性 •HLA-B27 (+) (2) Systemic autoimmune diseases ① Systemic Lupus Erythematosus 好發於中年女性,男女發病比率約1:10 ·產生抗核抗體 ANA(anti-dsDNA,-histone,-RNP,-SSA, -SSB, - Sm Ab), platelets, WBC, clotting factors 的自體抗體 Anti-dsDNA Smith Ab (anti-Sm) anti-SSA/Ro anti-SSB/La Anti-histone 特異性高,免感度較差 監測病情 特異性標誌,一種族不同,陽性率7-30%不等 Sm Ag 由 small RNA 組成,爲slisesome 成員 RNA-protein complex,anti-SSA/Ro 與新生兒狼瘡關係密切 藥物引起的 SLE 有 95%有 Anti-histone Ab •引發過度補體活化:C3a,C5a上升 3-4 倍,C3, C4 ↓ Neutropenia - C5a 誘導 CR3 - C5a 誘導 type3 補體受體表達,增強 neutrophil aggregation ・LE cell 狼瘡細胞:Neu.吞噬形成的免疫複合物→ 急性期出現 ●症狀:發燒虛弱、關節炎、皮膚紅斑、腎絲球腎炎、血管炎、光敏感 40
ページ38:
Tolerance and Autoimmunity ② Rheumatoid Arthritis ●APC 呈現抗原給 HLA-DR,活化 Th1, Th17 →釋放IFN-y, TNF-a,IL-17, IL-17, IL-21,引起發炎 ・ Th 促進 B cell 產生 anti-CCP, rheumatoid factor (RF) RF 結合 IgG 的 Fc部分→產生IgM-IgG 複合物 (RF 僅代表自體免疫發生,無法因此診斷為 RA) (SLE, 硬皮病等自體免疫疾病也出現 RF) 檢驗 Anti-CCP (cyclic citrullinated peptide) ·也與 anti-Sa, anti-keratin, anti-filaggrin, anti-perinuclear, HLA-DR4 相關 引起 type III hypersensitivity、慢性關節炎(小關節、手部關節)、皮下結節 ④ Multiple Sclerosis 多發性硬化症 自體免疫性 T, B cell 穿過血腦障壁,侵犯 CNS 白質,破壞 myelin,形成瘢痕 ●症狀:麻木、癱瘓、失明 ·常見於非裔、西班牙裔,好發於年輕、中年女性 與 HLA-DR15, HLA-DR2 相關 ⑤ Systemic Sclerosis 全身性硬化症/硬皮病 • ・皮膚、內臟結締組織 collagen 過度增生,引起纖維化 與 anti-Scl-70, anti-PM-Scl, anti-RNA pol, anti-topoisomerase ·與 anti-centromere, anti-kinetochore 有關 ・CREST (IcSSc) 局限性硬皮症 Treatments - C:calcinosis 鈣沉積 -R:雷諾氏症(末梢血管痙攣) -E:食道運動功能障礙 -S:指端硬化 -T:微血管擴張 1. 免疫抑制劑: 阻斷 TCR 訊號:cyclosporin A, FK506 抑制免疫反應:corticosteroids, cyclophosphamide, azathioprine 2. 移除胸腺:治療重症肌無力 3. 血漿置換術 Plasmapheresis: 治療格雷夫氏症、重症肌無力、風濕性關節炎、SLE 41
ページ39:
Tolerance and Autoimmunity 自體抗體 螢光型態 Homogenous 均勻型 (anti-histone, DNA) 對應抗體 Histone DNA-histone (DNP) 臨床意義 藥物誘發 SLE SLE, RA SLE 專一性 Peripheral (anti-DNA) dsDNA ssDNA SLE RNP MCTD Sm Ag SLE 專一性 抗核抗體 Speckled 斑點型 SSA, SSB Ag SjS, SLE ANA (anti-ENA) RANA RA Scl-70 PSS 專一性 Jo-1 PM, DM Discrete-speckled (anti-centromere) Coarse speckled *** Nucleolar (anti-nucleolar) 4-6S RNA, RNP Anti-Lamins Non-histone protein Scleroderma, CREST syndrome PCNA (Proliferating cell nuclear antigen) : SLE PSS, PM, DM, Scleroderma, SjS SLE,狼瘡腎炎 核膜 ANEA Anti-gp120 原發性膽汁肝硬化、自體免疫性肝炎 Anti-p80 coilin 原發性膽汁肝硬化 Granular Anti-Sp100 *anti-mitochondria Ab (AMA) C-ANCA Anti-Neutrophil Cytoplasmic Ab (ANCA) (anti-proteinase 3) Anti-Smooth muscle Ab (ASMA) Anti-cardiolipin Ab (ACA) P-ANCA (anti-MPO) 原發性膽汁肝硬化 Wegener's granulomatosis Small vessel vasculitis Liver disease、SLE 或梅毒患者可能出現 在梅毒、SLA 患者身上發現,導致 SLE 患 者習慣性流產、血栓 與自體免疫疾病相關的動物模式與 MHC allele 1. Animal moods 2. 相關 MHC allele Diseases Animal moods SLE (NZBXNZW) F1 EAE 實驗性自體免疫腦脊髓炎 Associated MHC allele HLA-DR2 MS 橋本氏甲狀腺炎 EAT,實驗性自體免疫甲狀腺炎 HLA-DR3 RA AA, autoimmune arthritis Diseases 古巴斯徹氏症 Multiple Sclerosis IDDM Myasthenia gravis Grave's Disease SLE 42 HLA-DR4 RA HLA-DR5 橋本氏甲狀腺炎 HLA-B27 與發炎疾病相關,尤其 是僵直性脊椎炎 HLA-B8 Sjögren's syndrome Myasthenia gravis
ページ40:
Properties Cytokines 1.為低分子量(<30kDa)的調節蛋白/醣蛋白,響應刺激而生成,在免疫系統中促進細胞間聯絡 2.分泌細胞:淋巴、免疫細胞、hematopoietic cells 3.分泌模式:autocrine action 自分泌、paracrine action 旁分泌、endocrine action 內分泌 4.依照結構分成 4 families : hematopoietic, interferon, chemokine, tumor necrosis factor family 5. 功能 ① 細胞間聯絡,與不同受體結合引發不同反應 ② 修改 cell movement, adhesion 的分子表現 ③ 調節 enzyme 活性、轉錄程序 ④ 影響 cell survival, apoptosis 6. 調節動力學 →協助先天性、適應性免疫、發炎反應、造血功能 ① Pleiotropic activity 多效性:對不同目標細胞有不同的影響 ② Redundancy 重複功能:多個cytokines 可以有相同功能 ③ Synergy 協同作用 ④ Antagonism 拮抗作用 ⑤ Cascade induction 級聯誘導 7. Receptor (1)不同受體的親合力與 common subunits 高/低親和力受體 與 common subunits 的作用 競爭 common subunits • Low affinity:Cytokine-specific subunits,不活化信號傳導 . High affinity: common B subunits,引起信號傳導 Cytokine-specific subunits 與 common B subunits 關聯,使訊號傳遞下去 不同受體競爭 common subunit 的 ligand-binding chains,共同調節 cytokine responses Cytokines (2)分類 IL-1 family . 功能:引發 proinflammation 訊號(mono., DC, Macrophage 抗原辨識後分泌) →傳訊給 liver,產出更多其他 cytokines (INF, IL-6, CXCL8 等) receptor family . Key members: IL-1a, IL-1B, IL-1Ra, IL-18, IL-33 受體結構:單體/異二聚體受體(結合成功能性受體)、inhibitory ligands(結合受體 成抑制性分子) NFB/MAPK Class 1 . 誘導 B, T cell 增殖(IL-2)、調節 Th 功能(IL-4)、初始 B cell 分化與抗體分泌(IL-6)、 促使 leukocyte lineage 分化(GM-CSF, G-CSF) Type I cytokine receptor Conserved 一 • 缺乏 subunity 造成 cytokines 傳訊受損→嚴重複合型免疫缺陷 cysteines WSXWS- • Key members:IL-2~7, 9, 11~13, 15, 21, 23; GM-CSF, G-CSF; OSM, LIF, CNTF ;生 長因子,泌乳激素 • subunit B, GP130,y: share common structural motif (four-helix bundle) * cytokine 最初與 a subunit 結合調節,接著附加亞基主導傳訊 - y: IL-2, 4, 7, 9, 15, 12 - B: IL-3, 5, GM-CSF - gp130:IL-6, 11, LIF, OSM, CNTF, IL-27 *IL-12, IL-23 有相同的IL-12RB,gp40 subunit,表現相似功能 43 JAK STAT signalling
ページ41:
Cytokines Class 2 Key members 被分成三群 interferons,對抗病毒、免疫調節重要 與 class 1 共有 conserved cysteine residues Type I IFN (IFN-a, IFN-ẞ): - 誘導產生 ribonucleases 抑制病毒RNA及蛋白質合成→用於治療肝炎病毒感染 ·由活化的 macrophage, DC,感染細胞分泌 ② Type IIIFN (IFN-y): – 活化 M1、刺激 cytotoxic T cell 分化→用於治療 leprosy, toxoplasmosis 弓形蟲 感染症 - 由活化的 NK, T cell 產生 ③ Type III IFN (IFN-入) - 上調控制病毒複製、宿主細胞增殖的基因 — Plasmacytoid DC 分泌 ④ IL-10, 19, 20, 22, 24 TNF family • 功能:調節各種細胞功能、包括分化、凋亡等 Type i cytokine receptor JAK STAT signalling . Key members: TNF-a, lymphotoxin a (LT-a, TNF-B),LT-B, BAFF, APRIL, CD40L, FAS(CD95), FASL TNE Lptor . 結構:受體為三聚體(TNF 爲三具體分子),可以是水溶性 or 膜結合 · TNF cytokine pathway 為免疫療法藥物的標靶 IL-17 family • 促進 proinflammatory, neutrophil-mobilizing (IL-17E 除外) . Key member:IL-17A(成熟T cell分泌),與Th17 相關,連接先天/適應性免疫 Chemokines NFB/JNK or FADD/CASPASE signalling 結構:IL17 多爲 homodimer,受體包含 IL-17RA~RE 五個穿膜蛋白,同源/異源組成二聚體/三聚體 →多樣化排列 ● 功能: – Small cytokine 誘導 WBC 直接移動 結合內皮細胞膜的 glycosaminoglycans,沿血管壁建立化學誘質梯度 *IL-8 屬於 CXC family 受體表達具多樣性:WBC 調節 chemokines 受體表達指引移動 Chemokine receptor family • 結構 G protein signalling – Chemokines 依照Cys 分成4個subclasses (CXCR, CCR, XCR, CX3CR1) -具有共同受體的趨化因子功能相似 屬於 G -protein 偶聯受體家族 (3)Cytokine Receptors 活化信號通路 正常訊號傳導路徑:cytokine 結合受體→活化 JAKs,磷酸化 Tyrosine 殘基→磷酸化的殘基作爲訊息傳遞 因子、轉錄活化因子 STAT 的月台→STAT 進入細胞核調控基因表達 Cytokines 調節 blood cell 生長分化 造血幹細胞 HSCs Common Myeloid Progenitors (CMPs) 顆粒球單核球前驅細胞(GMPs) Monocytes 發育 *IL-3,IL-5 提供分化特異性 Stem cell factor (SCF), IL-7, thrombopoietin (TPO) IL-3 (multicolony-stimulating factor 多樣株落刺激因子), GM-CSF, EPO G-CSF, IL-3/IL-5 M-CSF(IL-3) 44
ページ42:
先天免疫相關 Cytokines Type 1 INF -抗病毒活性,JAK/STAT pathway - 誘導產生 ribonucleases 抑制病毒 RNA及蛋白質合成→用於治療肝炎病毒感染 - 由活化的 macrophage, DC,感染細胞分泌 Cytokines IL-1a, B -誘導發炎反應(召集發炎細胞、增加血管通透性) IL-1B, TNF-a,IL-6刺激CRP產生 TNF-a IL-6 -ILR召集MyD88,活化的訊號傳遞類似TLR -活化 macrophage,增強吞噬作用 - TNF receptor 訊號傳遞路徑:TAK1 透過 JAK/STAT and MAPK pathway 刺激發炎反應 IL-12, IL-18 由 monocytes, macrophages, DC誘導,參與活化的Tcell 分化 IL-10 Anti-inflammation 活性。抑制 macrophage 活化、發炎相關 cytokine 釋放 45 45
ページ43:
HLA HLA Gene and structure 1. Human leukocyte antigens (HLAs)由 MHC 基因編碼,位於 6q Chromosome 6 Centromere Tel 車 DP region Long arm Class II DQ region DR region Cen Short arm Tel 。 Class III Class I BC A BC E A GF Telomere * MHC genes 特性:多型性 polymorphism、多基因性 polygeny、種族差異性、共顯性、連鎖不平衡 Class I genes:編碼在所有細胞上表達的醣蛋白,呈獻內源性 peptide 給 CD8 T cell Class II genes:編碼在APC上表達的醣蛋白,呈獻外源性 peptide 給 CD4 T cell *脂質抗原由 CD1 呈獻 Class III genes:編碼多種免疫功能相關的蛋白,包括補體、TNF,與抗原呈獻給 T cell 無關 2. MHC 分子結構 1. Class I MHC 分子: 在所有細胞上皆表達,但某些細胞表達量少或無法偵測 e.g. 肝細胞、神經細胞、肌肉細胞、sperm ↓產生多樣性的主要地方 (因此 HLA-mismatched 的肝臟移植仍能成功) Membrane-distal domains (many polymorphisms) a2 CD8 binds here a3 與CD8 分子作用 ← domains Membrane-proximal a3 (constant regions) Peptide-binding cleft a1 M (結合多肽 key point 中相似的 AA residues) (可呈現約8-13個AA的peptide) ↓B2-microglobulin 由第 15對染色體編碼 B2-microglobulin (coded by a gene in chromosome 15) Transmembrane segment 來自父母雙方的基因共顯性,子代細胞 上可表達6種不同的 MHC Class 1 分子 * MHC class I 的 HLA-B 多樣性最高 Cytoplasmic. MHC class II 的HLA-DRa 多樣性最低 • • 主要表現 HLA-A, B, C,其中A,B與移植最相關,C 表達最少 Nonclassical class I MHC分子: - HLA-E,F通常不表達也不呈現抗原 – HLA-G 在胎兒滋胚層細胞(懷孕早期),抑制母體 NC cell 活性,幫助建立對胎兒的免疫耐受 2. Class II MHC 分子: Peptide-binding cleft ← peptide-binding groove 可結合的多肽較 class I 長 • 主要表達 HLA-DP, DQ, DR Membrane-distal domains Membrane-proximal domains B1 (可呈現約15-24 個AA的 peptide) 02 82 Cytoplasmic. tail → HLA_DR 表達最高,且DR有高度多樣性 46 CD4 binds here ← 32 與CD4 結合 Transmembrane segment. 子代細胞除了可表達6種 MHC class II 分子外,還可將來自父母的a, chain 重組成異源分子,共有12種分子表達
ページ44:
Presentation pathway Class I tapasin TAP MHCI MHC class I Opeptide HHC11 從PLC中釋放離開 ER到 cell surface MACI RE calreticulina ERps' cahexin08 鈣網. 鈣連蛋白. 0 蛋白 Cytosol 0 B2m 1 ½k MHC BJ d chain後calhexin peptide-loading complex (PLC) Class II - 在囊泡中的 MHC 分子結合 invariant chain 中的 CLIP,防止過早與 peptide 結合 →Nonclassical class II MHC HLA-DM 介導 clip 與 peptide 的交換 →HLA-DO 結合 DM 抑制其作用,負調節 MHC II 分子的抗原呈現 1. APC cell 有MHCⅢ的vesicles 與含有peptide的屬合 抗原进入cell PH-7. Endosomal 酸化 →蛋白酶被活化 分解抗原 Professional APCs DC, macrophages: 透過吞噬抗原、受感染細胞,表達 DAMP(損傷相關分子模式)、PAMP、凋亡細胞的受體(高 MHC II 表達) B cells: 透過BCR 內化抗原 Atypical APCs Mast cells, basophils, eosinophils, ILC3... 在特定的免疫環境下表達 2. DC 受到 CD4 T cell 許可,呈現抗原活化 naive T cell * CD4 許可:產生 local IL-2、上調共刺激因子等 3. 病毒干擾 MHC class I 表達: ・CMV 的蛋白結合 B2-microglobulin,阻止 MHC class1分子聚集、運送到細胞膜 . ·Adenovirus 12:降低 TAP1, TAP2 基因的轉錄 4. Cancer cell 中MHCI表達減少或缺失 逃脫免疫系統偵測 Autoimmune disease and HLA typing Diseases 相關 HLA alele Ankylosing spondylitis 僵直性脊椎炎 重症肌無力 B27 B8 Multiple sclerosis DR2 Addison's disease, Graves' disease DR3 SLE DR3 Rheumatoid arthritis 類風濕關節炎 DR4 Celiac disease 乳糜瀉(麩質敏感) Type1 diabetes DR3, DQ8, DQ2 DQ2, DQ8 47 HLA
ページ45:
HLA 移植排斥 Autograft 自體移植 Isograft 同種移植 Allograft 同種異體移植 Xenograft 異體移植 1. Hyperacute rejection 超急性排斥 • ·移植後幾小時內出現 抗體預先存在於受贈者體內→抗體攻擊移植器官的血管 活化補體、血栓形成→組織缺血、壞死 2. Acute rejection 急性排斥 • 移植後幾週~幾個月內出現 Alloantigen 特異性活化 CD8T cell→攻擊移植組織 • CD 4 T cell 也受活化→引起第四型延遲性過敏反應 3. Chronic rejection 慢性排斥 移植後幾個月或幾年後出現 多種因素導致 Graft Arteriosclerosis 移植物動脈硬化 誘發因素:反覆急性排斥、發炎反應、對外來 HLA 的過敏反應、Alloantigen 產生 4.Graft-Versus-Host Disease (GVHD)移植物反宿主疾病 . ·移植物中存在的 lymphocytes 攻擊受贈者組織 48
ページ46:
Type I 1. IgE, Mast cell 參與 *IgE 的受體 FcεRI 高親和力 IgE 受體 Hypersensitive FCεRII (CD23) c-type lectin,以低親和力結合 IgE 在 mast cell, basophil 上表達 在 B cell, T cell,單核球、eosinophil, DC 表達 2.反應過程 ① 致敏化 初次接觸過敏原, Th2分泌IL-4, IL-13, IgE結合mast cell上的FceRI APC呈現Ag給Th 促進B cell抗體型別轉換成IgE (Th2 的產生:ICL-2 分泌 IL-5→嗜酸/嗜鹼性球分泌IL-4 活化 Th2) ② 活化 再次接觸過敏原 過敏原結合IgE受體 已被致敏化的mast cell/ basophil 受到活化,釋放cytokines HLA Mast cell 效應功能:釋放初級介質(Histamine, heparin, proteases, eosinophil/neutrophil 的趨化物質) ③ Late-phase • . 多種細胞浸潤,釋放次級介質:Platelet-activating factor (PAF), prostaglandin D2, leukotrienes, and cytokines (次級介質更強效,延長過敏反應,導致慢性發炎及組織損傷) • Eosinophil 的效應功能:表面 IgE 受體增多,釋放高毒性顆粒、自由基 3. 過敏因素 Hygiene hypothesis 早期接觸某些病原使 Th1 增多,與Th2 拮抗避免過敏 Counter regulation hypothesis | 早期接觸某些病原使 cytokines 抑制過敏發展 4. Example:過敏性鼻炎(Hat fever,乾草熱/花粉熱)、氣喘、尋麻疹、食物過敏 Type II 活化補體,cell lysis 1.機制: Ab (IgG, IgM)結合細胞 也可能影響細胞功能, 調理,促進吞噬 表面抗原(多為自身抗原) 或異常刺激細胞功能 ADCC,NK/巨噬細胞釋出毒素 2. Example ① 輸血性疾病:最常見ABO血型不合 ② 新生兒溶血:最常由D抗原不合引起,母親D(-)受到初次致敏化產生的anti-D通過胎盤,造成新生 兒溶血(血管内溶血) ③ 自體免疫溶血性貧血:由37℃反應性抗體引起,可能由感染、自體免疫疾病或藥物引起 *多數微血管外溶血 ④ Paroxysmal cold hemoglobinuria PCH 陣發性冷性血紅素尿症 ●機制: Donath-Landsteiner (DL) Ab (爲IgG) 溫度回升至37℃時發生急性溶血 受寒冷誘導,與RBC結合 並活化補體 . 多與感染相關:B19、先天性梅毒、MMR、肺炎黴漿菌 ⑤ Cold agglutinin disease CAD 冷凝集素疾病 與 RBC 抗原(常見I抗原)反應的IgM 在體溫較低處凝集,導致溶血性貧血 ⑥ 自體免疫疾病: Goodpasture'ssyndrome 古巴斯徹氏症,橋本氏甲狀腺炎, Grave's Disease, 重症肌無力, Insulin-DependentDiabetesMellitus(IDDM) 49
ページ47:
Hypersensitive Type III 1. 機制: 可溶性抗原結合抗體,形成 immune complex 若沉澱物沒有及時清除→活化補體造成組織損傷 2. Example ① Arthus reaction 亞瑟士反應 抗原注射後,在注射部位形成大型免疫复合物→局部紅腫、纖維蛋白沉積 • 觸發因素:自然的受叮咬、吸入眞菌等,人為注射疫苗 ② Serum sickness 血清病 • • 注射外來血清後,對非自體蛋白產生免疫复合物,導致發生、關節痛、紅疹、嘔吐等 注射後1-3週產生 ③ 自體免疫疾病(SLE, RA)引起的腎絲球腎炎、關節炎等 ④ 其他:感染、蜜蜂叮咬、藥物、疫苗 Type IV, Delayed-type hypersensitivity 1. T cell (Th1)介導延遲性過敏反應 2.機制: ①致敏化(1-2週):接觸性抗原、細胞內抗原由APC 呈現給 Th,誘導 Th1 分化 ② 反應期(48-72 小時):二次接觸抗原,活化Th1→產生IFN-y, TNF-a, TNF-B 活化巨噬細胞 * Macrophage 的效應功能:增強吞噬、毒殺、釋放 cytokines, chemokines 3. Example ① 接觸性皮膚炎 ② Celiac disease 乳糜瀉 • 麩質引起的慢性病,與HLA-DQ2 相關 gluten peptide被MHCII呈現 活化gluten-specific CD 4 T cells 釋放cytokines ③ 過敏性肺炎 吸入抗原(細菌/眞菌孢子、粉塵) 可能引發慢性間質纖維化、肉芽腫 Test Type 1 體外皮膚試驗 體內試驗 活化腸上皮內淋巴細胞IEL 攻擊上皮細胞 活化B cell釋放 anti-transglutaminase 2 (TG2) Cytokines活化fibroblast 造成小腸細胞受損、萎縮 ・Skin prick test 皮膚針刺試驗:特異性較高,較簡便快速 · Intradermal test 皮內試驗:敏感度較高 特異性 IgE 檢測:早期 Prausnitz-Küstner (PK) test, Radioallergosorbent Test (RAST), ImmunoCAP · Total IgE 檢測: Radioimmunosorbent Test (RIST) RAST← TIE Capture 1.1 Type 2 ・DAT:測 RBC 上的抗體 ・IAT:測血漿中存在的抗體 RIST← . ,冷凝集素測試:測試 cold agglutinin IgM titer,titer> 64則有臨床意義 檢測自體免疫抗體、螢光染色免疫複合物、測量 complement level Type 3 Type 4 Patch Test、結合菌素皮膚測試 50
คำถามที่เกี่ยวข้องกับโน้ตสรุปนี้
มัธยมต้น
คณิตศาสตร์
ขอถามคนที่เรียนคณิตเก่ง ๆ หรือสายวิทย์หน่อยค่ะ 🙏 เราอยากเริ่มปูพื้นฐานคณิตใหม่ แต่ไม่รู้ควรเริ่มจากตรงไหนดี ตอนนี้เราอยู่ ม.3 กำลังจะขึ้น ม.4(สายวิทย์-คณิต) พื้นฐานยังไม่แน่นเท่าไหร่เลยค่ะ😭💔😔อยากขอคำแนะนำหน่อยค่ะ ควรเริ่มอ่านจากบทไหนก่อน มีวิธีฝึกยังไงให้เข้าใจจริง ๆ มีหนังสือ/ช่องยูทูบป/เพจไหนแนะนำบ้าง ขอบคุณล่วงหน้ามากๆเลยนะคะ 🫰🏻🫰🏻💘🫠
มัธยมต้น
คณิตศาสตร์
มีใครแนะนำชีทที่เกี่ยวกับพีทาโกรัสมั้ยคะ ตอนนี้ไม่ค่อยเข้าใจเลยค่ะ🥹♥️
มัธยมต้น
คณิตศาสตร์
อยากได้สรุปวิชาวิทกับคนิต ค่ะ พอดีพรุ่งนี้ต้องสอบเข้าม.4แล้ว ใครมีคำแนะนำอะไรเม่นแลกเปลี่ยนกันได้นะคะ
มัธยมต้น
คณิตศาสตร์
พี่ๆคะ😭😭 หนูอยากสอบโรงเรียนแกลงวิทยาถาวรค่ะสอบเข้าชั้น ม.1 หนูอยากสอบเข้าห้องวิทคณิตค่ะแต่หนูยังอ่อนคณิตอยู่หนูอยากได้คำแนะนำแนวข้อสอบว่ายากมั้ยออกเรื่องอะไรบ้างพี่ๆคนไหนที่เคยสอบเข้าห้องวิทคณิตม.1ได้ช่วยหนูหน่อยนะคะ😭🙏
มัธยมต้น
คณิตศาสตร์
พี่ๆคะ หนุมีแพลนสอบเข้า ม4ห้อง smte ของสสวท โรงเรียนเดชะฯปัตค่ะ พื้นฐานไม่ค่อยแข็งแรงมีเวลาอีก1ปีกับการติว ให้คำแนะนำหน่อยค่ะ แปะอจ ไว้ได้นะคะ😭🙏🏻
มัธยมต้น
คณิตศาสตร์
มีพี่ๆคนไหนเคยสอบเข้าม.4จ.ภมั้ยคะ ตอนนี้หนูกำลังจะม.2อยากเตรียมตัวไว้ก่อนมีพิกัดชีทสรุปมั้ยคะ หรือหนังสืออ่านแล้วเข้าใจง่ายแนะนำมั้ยคะ🙏🙏🙏
มัธยมต้น
คณิตศาสตร์
อยากรู้แนวสอบเข้าม.4สภาราชินิตรังจังเลยค่ะะ😭😭
มัธยมต้น
คณิตศาสตร์
แนะนำหนังสือเตรียม ม.4หน่อยค่ะ ว่าจะอ่านเตรียมมหาลัยควบคู่ไปด้วย #dek72
มัธยมต้น
คณิตศาสตร์
อยากได้เกรดสอบปลายภาคยังไม่ได้เริ่มอ่านเลยทำำงดีีีีี
มัธยมต้น
คณิตศาสตร์
ให้ก็ได้ค่ะแนะนำเนื้อหาเกี่ยวกับม.3ให้หน่อยได้ไหมคะ อยากเก็บเกรดวิท-คณิตค่ะ ขอทั้งเนื้อหาเทอม1และเทอม2เลยได้ไหมคะ จากใจเด็ก73
News
ความคิดเห็น
ยังไม่มีความคิดเห็น