ノートテキスト
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物理 ~クロマトグラフィール
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<クロマトグラフィー> 固定相と移動相の親和性の違いにより分離精製する方法 溶媒(移動相) ・試料(A・B・C) 琉填した粒子 C (固定相) B C シリカゲル ODS A B ← 検出器 イオン交換樹脂 ゲル 固定相と仲の良い(親和性高)し、 移動しにくく、 検 移動相と仲の良い(親和性⑥)Aは、 すばやく移動する P k 固定相に存在する物質量 移動相に存在する物質量 → 質量分布比(k=国との親和性 固定相 吸着型 固体 ex) シリカゲル 分配型 液体 ex) オクタデシルシリル(ODS)化シリカゲル イオン交換型陽or陰イオン交換体 サイズ排除型ゲル B C t
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指標 保持時間 式 説明 試料注入時からピーク頂点までの時間 備考 物質固有値 tp = (1+k) to 定性試験に利用可能 tRe-to 分離係数 d=topi-to 2つのピークの保持時間の差 ・分離回 分離度 RS=1.18× tre -turi Wo.5hl+W0.5m2 2つのピークの保持時間とピーク幅との関係 Rs大 分離回 15以上で完全分離 to 理論段数 N=5.54× W0.5m² バンドの広がり度合い NⓇ 分離◎ 理論段高さH=LIN カラム全長を理論段数で割ったもの H① → 分離回 対称性の度合い テーリング シンメトリー係数 = W0.05h リーディング しっぽこうし 正規分布 テーリング 27 Ä Ä Ä リーディング N = 1 $>1 $<1 前進 =まえ⑥ <液体クロマトグラフィー> (高速液体クロマトグラフィー) 移動相は液体。吸着型、分配型、イオン交換型、サイズ排除型、アフィニティー型に対応 順相クロマトグラフィー 逆相クロマトグラフィー 固定相=ODS(極性) →水っぽい(OH) →油っぽい(18) 固定相=シリカゲル(極性馬) A A ・シリカゲル (-01) 試料 極性高 ・極性 ODS A A
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(イオン交換クロマトグラフィー> アミノ酸混合物やタンパク質の分析 陽イオン交換クロマトグラフィー +をつかまえる 自身は 503- +1 H H2-N-R 503- H 505 陽イオン交換体 陰イオン交換クロマトグラフィー 日をつかまえる 自身は+ N+CC2H5) 3 TOOC-R -NT (C₂HS) 3 \N" N+(CH5) 3 陰イオン交換体 ラベルイル・アミノ酸を検出しやすいようにする ex) OH +RNH2 OH 0 アミノ酸 ニンヒドリン 0 OH N 可視部検出 ex) ・CHO +RNH. R-SH N-R CHO アミノ酸 オルトフタルアルデヒド 蛍光検出 紫色
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<サイズ排除型クロマトグラフィー> 分子を大きさによって分離する方法(分ふるい効果) 固定相 ゲル →食物繊維が からみ合っているもの +αゲル電気泳動 試料 十 分子量の大きいものから溶出 <ガスクロマトグラフィー> 移動相が気体(N.H.Ar. He = 不活化ガス) 揮発性①は誘導体化を行う。気化しにくいものは、トリメチルシリル化 小さいものほど 移動する R-OH(ガスになりにくい) ↓トリメチルシリル化 CH3 R-O-Si-CHs CH. 水素結合が消失 →ヴスになりやすい 検出器 対象試料 水素炎イオン化検出器 電子捕獲(イオン化)検出器 炎光光度検出器 アルヤリ熱イオン化検出器 C-Hを有する有機物 ハロゲン ゴロガス欠!エンジンStop! ガス検出器 炎光 S.P イオウリン 窒素 リン 電子ハロゲン HCH のみ 電波と水のみあるピクニック アルカリ P.N
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